[發(fā)明專利]一種嗜熱酯酶及其在降解PAEs中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310178873.7
• 申請日: 2013-05-14
• 公開（公告）號: CN104152425A
• 公開（公告）日: 2014-11-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 范翔;張曉彥;李騁遠(yuǎn);邢帥;許建和
• 申請（專利權(quán)）人: 華東理工大學(xué)
• 主分類號: C12N9/18
• 分類號: C12N9/18;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/21;A62D3/02;C12R1/19;C12R1/01;A62D101/28
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 鐘華;沈利

1.一種分離的酯酶，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

2.一種酯酶融合蛋白，其特征在于，所述的酯酶融合蛋白是氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示的酯酶添加一肽段后的融合蛋白，所述的肽段是表達(dá)親和層析標(biāo)簽His-tag。

3.一種分離的編碼權(quán)利要求1所述的酯酶的核酸，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

4.一種包含如權(quán)利要求2所述的核酸的重組表達(dá)載體。

5.一種重組表達(dá)轉(zhuǎn)化體，其特征在于，該重組轉(zhuǎn)化體包含如權(quán)利要求4所述的重組表達(dá)載體。

6.一種鄰苯二甲酸酯的生物酶降解法，其特征在于，包括以下步驟，在含水介質(zhì)中，在氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示的酯酶或其融合蛋白的催化下，鄰苯二甲酸酯進(jìn)行水解反應(yīng)，形成鄰苯二甲單酸和醇，再形成鄰苯二甲酸和醇。

7.如權(quán)利要求6所述的生物酶降解法，其特征在于，所述的鄰苯二甲酸酯是如式（Ⅰ）所示的化合物，鄰苯二甲單酸是如式（Ⅱ）所示的化合物，鄰苯二甲酸是如式（Ⅲ）所示的化合物，

其中，R₁和R₂分別或同時代表C2-C10直鏈烷基。

8.如權(quán)利要求6所述的生物酶降解法，其特征在于，所述含水介質(zhì)為磷酸緩沖液、Tris-HCl緩沖液、巴比妥鈉緩沖液或者硼酸-硼砂緩沖液。

9.如權(quán)利要求6所述的生物酶降解法，其特征在于，所述的含水介質(zhì)還含有能夠溶解鄰苯二甲酸酯的有機(jī)溶劑，所述的有機(jī)溶劑和含水介質(zhì)的體積比為1:1000-1:9。

10.如權(quán)利要求6所述的生物酶降解法，其特征在于，所述水解反應(yīng)的反應(yīng)溫度是37-60℃，所述水解反應(yīng)的反應(yīng)時間是1分鐘-24小時。