[發明專利]細胞散射光多位置檢測方法及細胞分析儀

無效

• 申請號: 201310176763.7
• 申請日: 2013-05-14
• 公開（公告）號: CN103278440A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發明（設計）人: 唐雪輝
• 申請（專利權）人: 桂林優利特醫療電子有限公司
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司 45107
• 代理人: 歐陽波

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，具體涉及一種細胞散射光多位置檢測方法及細胞分析儀。

背景技術

流式細胞儀（flow?cytometer,FCM）是依據光散射理論的一種細胞分析儀器。當激光照射到流動室內流過的單個排列的每一個細胞時，由于細胞的物理特性，部分光線從細胞上經不同的角度散射。其中，前向小角度散射光的光強可以反映細胞體積；大角度散射光的光強可以反映細胞核復雜度和細胞顆粒的信息；而側向散射光的光強可以反應細胞膜、核膜、細胞質的變化，從而對細胞進行分類，和對細胞DAN、RNA進行分析。

現有的流式細胞儀是通過鞘流技術將細胞排成1列，逐個通過鞘流器的光學檢測窗口，激光器產生的激光照射在光學檢測窗口，單個細胞依次受到激光照射，散射出前向0度、10度散射光和90度散射光。每個前向和90度方向上安置一套檢測裝置，光電倍增管將散射光強度轉換為電信號，供計算機分析。

細胞散射光本來就不強，在90度方向的散射光還要進行2次、3次甚至更多次的分光，以進行偏振光、消偏振光、熒光激發光等不同檢測，每次分光其強度都至少減弱50%。為了檢測細胞的90度散射光信息不得不用高增益的光電倍增管，無法避免噪音加大，這使流式細胞儀的成本加大，且整臺儀器的準確性和穩定性也難以進一步提高。

發明內容

本發明的目的是設計一種細胞散射光多位置檢測方法，在細胞散射光的每個角度的多個位置設置檢測裝置，獲得的細胞散射光的強度加倍。

本發明的另一目的是根據上述本細胞散射光的多位置檢測方法設計一種細胞散射光多位置檢測細胞分析儀，在與激光方向成90°的細胞的散射光平面上的多點設置檢測裝置，以成倍獲得細胞散射光，可用較低增益的光電倍增管，降低成本，提高儀器整體的準確性和穩定性。

當激光照射在單個細胞上，細胞在90°方向的散射光處于與激光方向成90°的平面上，那么在這個平面上均可檢測細胞90°散射光，且在此平面上與細胞距離相等處檢測所得的細胞散射光信息是等同的。

本發明細胞散射光多位置檢測方法是在與激光入射方向成90°的細胞的散射光的平面上，取2～4個檢測點，檢測細胞的90°散射光。

所述的2～4個細胞90°散射光的檢測點與鞘流管中心線的距離相等。

當所用鞘流管截面為矩形時，取在鞘流管壁上下或左右的以鞘流管中心線為對稱的2個點為檢測點，或者取在鞘流管壁外周以鞘流管中心線兩兩對稱的4個點為檢測點。

根據上述本發明細胞散射光的多位置檢測方法設計的細胞散射光多位置檢測細胞分析儀，包括激光照射機構、細胞鞘流機構、散射光采集機構和信號分析處理機構，細胞鞘流機構使待分析的細胞在鞘流液中排成單列沿其鞘流管直線流動，激光照射機構產生的激光對鞘流管內的細胞依次進行照射，激光入射方向與鞘流管走向垂直，散射光采集機構包括1套前向散射光檢測器和2～4套90°散射光檢測器，前向散射光檢測器設置于與激光同向、前方10°位置，90°散射光檢測器設置于激光入射處與激光入射方向垂直的平面上。

各90°散射光檢測器所處位置與該鞘流管中心線的距離相等。可采用相同的散射光檢測器模塊。

當所用鞘流管截面為矩形時，在激光入射處與激光入射方向垂直的平面上的90°散射光檢測器位于鞘流管壁上下或左右的以鞘流管中心線為對稱的2個點，或者位于鞘流管壁外周以鞘流管中心線兩兩對稱的4個點。

最佳方案為在激光入射處與激光入射方向垂直的平面上的90°散射光檢測器位于鞘流管壁左右的以鞘流管中心線為對稱的2個點，此兩點的連線為水平線。

與現有技術相比，本發明細胞散射光多位置檢測方法及細胞分析儀的優點為：1、在原檢測光路的基礎上，增加了90°散射光的檢測通道，獲得的90°散射光信號光強是原設計的2～4倍；2、由于獲得的90°散射光信號光強高，信噪比提高，細胞分析的準確性和穩定性提高；3、無需配用高增益的光電倍增管，降低了對儀器電路放大倍數和去噪功能的要求，儀器成本降低，可靠性提高。

附圖說明

圖1為本細胞散射光多位置檢測方法實施例原理示意圖；

圖2為本細胞散射光多位置檢測細胞分析儀實施例結構示意圖。

圖中標號為：

1、激光照射機構，2、90°散射光檢測器，3、細胞鞘流機構，4、前向散射光檢測器。

具體實施方式

以下結合附圖和具體實施例進一步詳細說明本發明。

細胞散射光多位置檢測方法實施例