[發明專利]一種百合花粉的貯藏方法

無效

• 申請號: 201310173676.6
• 申請日: 2013-05-10
• 公開（公告）號: CN103238589A
• 公開（公告）日: 2013-08-14
• 發明（設計）人: 高紅勝;陸志新;路廣;黃金福;馬文;高新年
• 申請（專利權）人: 揚州大學;宜興市湖濱百合科技有限公司
• 主分類號: A01N3/00
• 分類號: A01N3/00
• 代理公司: 南京天翼專利代理有限責任公司 32112
• 代理人: 湯志武

技術領域

本發明涉及一種百合花粉的貯藏方法。

背景技術

花粉是有花植物的小孢子，萌發時產生含三個單倍體核的雄配子體，其包含著該植物的全部遺傳信息，是植物雜交育種和種質資源保存的重要材料?；ǚ凵盍κ侵富ǚ鬯哂械拇婊睢⑸L、萌發或發育的能力，是雜交育種成功的關鍵因素之一?；ǚ蹓勖腔ǚ墼谝欢l件下花粉保持生活力的期限。

百合(Lilium?spp.)是重要的球根花卉。百合花粉的自然壽命短，雜交育種時常常會遇到父母本花期不遇和遠距離雜交等問題，育種者需要通過花粉貯藏解決上述問題；另外,花粉貯藏也是百合種質資源的保存的重要技術。

百合種類繁多，成熟的百合花粉在自然條件下壽命只有1-3周，現有貯藏方法是將百合的花粉在低溫或超低溫條件下保存，通過控制溫度來延長花粉的壽命，具體是將采集的百合花粉在恒定的5℃、-18℃等低溫條件下保存，或在超低溫-80℃及-196℃（液氮）的低溫條件下保存。上述貯藏方法存在如下缺陷：

1、在5℃、-18℃等溫度下，百合花粉壽命維持的時間較短，只能保持30-80天,并且花粉壽命保持的長短不穩定,不能滿足育種者對百合花粉的周年或更長期的貯藏的要求。

2、超低溫條件下保存,需要超低溫冰箱或液氮,保存的成本高，使用時必須將貯藏的花粉在不同溫度下依次逐步蘇醒，程序復雜繁瑣。

發明內容

本發明的目的是提供一種百合花粉的貯藏方法，該方法能使百合花粉的貯藏壽命在5℃溫度下就能穩定地延長到1年以上，且保存方式簡便實用。

申請人經研究發現，百合花粉壽命的長短除了受自身遺傳特性影響外，環境條件尤其是溫度和濕度對花粉的生活力有很大影響，其中環境濕度的影響相對更大，濕度過高過低都會嚴重影響花粉的貯藏壽命。在溫度5℃條件下，相對濕度為60-70%時百合花粉的貯藏壽命最長，可以達到1年以上。

基于上述研究，本發明通過同時控制溫度和濕度兩個重要影響因子來延長百合花粉的壽命，其具體技術方案如下：

1）恒濕鹽溶液—亞硝酸鈉飽和溶液的配置；

2）將配置好的硝酸鈉飽和溶液加入到在干燥器底部，至液面距離干燥器瓷板保持1-2cm間距，密封后備用；

3）將收集的花粉裝入明膠空心膠囊中，蓋上膠囊蓋后，在膠囊兩端各刺一個小孔，以利氣體交換；

4）將裝入花粉的膠囊放入信封或紙袋中，用回形針封口后放置在干燥器瓷板上，用回形針封口的目的是利于氣體交換；

5）將干燥器密閉后放入5℃冰箱中長期保存。

步驟1）中，為了保證恒濕效果，亞硝酸鈉飽和溶液用蒸餾水或純水配制，所采用的亞硝酸鈉為分析純，所配制的亞硝酸鈉飽和溶液在溫度降到5℃時應有30%以上的亞硝酸鈉析出；

步驟2）中，硝酸鈉飽和溶液的加入量根據干燥器的規格大小定，干燥器規格根據冷藏箱的大小和需要貯藏的花粉量而定，可選用內徑為100mm-180mm的不同規格干燥器。硝酸鈉飽和溶液加入后使液面距離瓷板保持1-2cm距離的目的是防止操作時液體影響瓷板上方。

步驟3）中，為保證所采集的花粉具有較高生活力，所述花粉是開花當日采集的花粉，采集時用軟毛刷來收集百合花粉；所采用的膠囊優選醫用明膠空心硬膠囊，為不影響膠囊的透氣性，每個膠囊裝入量不超過20mg，膠囊兩端的小孔孔徑為0.5-0.7mm，過小不利于氣體交換，過大會導致花粉泄出。

本發明具有如下優點和進步：

1、溫度控制采用普通冷藏冰箱即可，簡便易行；

2、亞硝酸鈉飽和溶液恒濕，該溶液的相對濕度受溫度變化的影響小，因此能夠恒定溶液上方空氣的相對濕度，保持三相熱力學平衡，當溫度在-5℃到30℃范圍變化時干燥器內的相對濕度為63-66%，因此恒濕效果穩定；

3、采用明膠膠囊定量存放花粉，可以保證貯藏期間花粉周環境條件的均勻性和穩定性，而且花粉的取用時可以按實際需求量來去，方便簡單。

4、本方法不僅能保持了溫度恒定，而且能恒濕，在5℃溫度和60-70%相對濕度下，百合花粉壽命可以保持1年以上。

具體實施方式

1）恒濕鹽溶液亞—硝酸鈉飽和溶液的配置

取100ml純水，中加入亞硝酸鈉110g，加熱溶解。

2）取200ml配置好上述溶液加入到在內徑為100mm的玻璃干燥器底部（GB/T15723-1995），至液面距離干燥器瓷板為1-2cm，密封后備用；