[發(fā)明專(zhuān)利]CHIP蛋白在胰腺癌早期診斷以及預(yù)后判斷中的用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310172510.2
• 申請(qǐng)日: 2013-05-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104142403B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙玉沛;張?zhí)?/a>;王天笑;由磊;周立;廖泉;戴夢(mèng)華;舒紅;徐建威;李建;曹喆
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/68
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 北京戈程知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11314
• 代理人: 程偉,韓文華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及CHIP蛋白作為診斷胰腺癌患者以及評(píng)估胰腺癌患者預(yù)后的血清標(biāo)記物的用途。

背景技術(shù)

胰腺癌是最難早期發(fā)現(xiàn)、惡性程度最高和預(yù)后最差的腫瘤之一。美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)對(duì)美國(guó)腫瘤發(fā)病率及死亡率的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，胰腺癌占全部腫瘤死亡原因的第四位，5年生存率在5%以下。其死亡的主要原因是超過(guò)50%患者在發(fā)現(xiàn)時(shí)已處于晚期，腫瘤已包繞血管或發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，且對(duì)傳統(tǒng)的放化療或靶向治療具有一定耐受性。因此，提高胰腺癌的早期診斷率，抑制腫瘤的生長(zhǎng)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，提高藥物的治療效果，成為改善胰腺癌患者預(yù)后的關(guān)鍵因素。

由于胰腺癌臨床發(fā)病隱匿，發(fā)展迅速，具有較高的侵襲性，而且通常在出現(xiàn)臨床癥狀時(shí)已進(jìn)入晚期，此時(shí)進(jìn)行手術(shù)及放化療效果極差，而改變這種情況的關(guān)鍵在于早期的診斷和治療。因此，對(duì)于胰腺癌的腫瘤標(biāo)記物的研究有助于腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)，有助于對(duì)胰腺的良性病變或惡性腫瘤的鑒別診斷，為早期手術(shù)治療提供診斷依據(jù)。由于血清中可能含有較多的腫瘤標(biāo)記物，同時(shí)血樣的采集安全可靠，因此，通過(guò)血清學(xué)樣本對(duì)無(wú)癥狀患者進(jìn)行胰腺癌的篩選具有很大的潛力。目前臨床上常用的胰腺癌腫瘤學(xué)標(biāo)志物是CA19-9和CA142。CA19-9是一種唾液酸Lewis血型類(lèi)粘蛋白糖蛋白抗原，與Lewis血型成分有關(guān)，用于鑒別正常人和胰腺癌患者的敏感性為79%（70%-90%），特異性為82（68%-91%），其中約5%-14%的人群缺乏Lewis抗原糖基轉(zhuǎn)移酶而不能合成CA19-9，即使發(fā)生胰腺癌后其CA19-9的表達(dá)并不升高；而急性膽管炎，胰腺炎膽汁淤積等非胰腺腫瘤疾病均可導(dǎo)致CA19-9表達(dá)的增加。因此，CA19-9表達(dá)水平的改變更多的是作為手術(shù)或放化療后腫瘤復(fù)發(fā)的依據(jù)。CA242也是一種唾液酸化的粘蛋白類(lèi)型糖抗原，由于同時(shí)受到Lewis血型的影響所以靈敏度與CA19-9相似，約為75%（65%-82%），特異性為90%（65%-95%），在與慢性胰腺炎、良性肝病、膽汁淤積等方面診斷效率略好于CA19-9。這些標(biāo)志物用于鑒別診斷的準(zhǔn)確性并不高，常需要聯(lián)合使用。因此，還需要尋找一些敏感性或特異性更好的腫瘤學(xué)標(biāo)志物用于早期診斷。

C末端Hsc70反應(yīng)蛋白（命名為CHIP）是一個(gè)種屬間高度保守的胞漿蛋白，在平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、骨骼肌和大腦中高度表達(dá)。它含有三個(gè)功能區(qū)，N末端的TPR功能區(qū)、C-末端的U-盒子功能區(qū)和中間的正負(fù)電荷富集區(qū)。CHIP作為一個(gè)陪伴蛋白（chaperone）即可通過(guò)TPR基序（motif）與熱休克蛋白Hsp70和Hsp90相互作用，輔助新生蛋白折疊，形成具有正常結(jié)構(gòu)和功能的蛋白，抑制變性蛋白的聚集；又可通過(guò)U-盒子功能區(qū)作為E3連接酶，促進(jìn)蛋白底物的泛素化降解。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)CHIP在多種腫瘤中發(fā)揮重要的作用。可與CHIP結(jié)合并發(fā)生降解的蛋白包括突變的p53，雌激素受體，erbB2，SMAD3，HIF-1，SRC-3，NF-κB，c-Myc，以及磷酸化的AKT等，這些底物都與腫瘤的增殖、侵襲或轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)。另一方面，CHIP在乳腺癌、胃癌及腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)水平要明顯低于癌旁的正常組織，這些結(jié)果均提示CHIP在多種腫瘤中發(fā)揮抑癌的作用，目前關(guān)于腫瘤患者血清中CHIP表達(dá)水平國(guó)內(nèi)外并沒(méi)有相關(guān)的報(bào)道。

本發(fā)明來(lái)源于一個(gè)驚人的方法，即，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)正常人、慢性胰腺炎患者和胰腺癌患者三者血清CHIP表達(dá)水平有顯著性差異。這一結(jié)果為胰腺疾病的鑒別診斷以及預(yù)后提供了一個(gè)新的思路。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，癌組織表達(dá)水平高于癌旁組織，其表達(dá)與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和術(shù)后轉(zhuǎn)移負(fù)相關(guān)；CHIP高表達(dá)患者預(yù)后相對(duì)較好，是影響胰腺癌預(yù)后的可能危險(xiǎn)因素。CHIP在慢性胰腺炎，胰腺癌患者血清中表達(dá)水平明顯降低；在胰腺癌患者中，其表達(dá)水平與腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)，CHIP可作為鑒別正常人、慢性胰腺炎和胰腺癌患者有效的血清學(xué)標(biāo)志物。

一方面，本發(fā)明提供了一種CHIP蛋白在用于制備診斷胰腺癌患者的試劑盒中的用途。

進(jìn)一步地，本發(fā)明提供了一種CHIP蛋白作為區(qū)分正常人、慢性胰腺炎和胰腺癌患者的有效的血清學(xué)標(biāo)志物中的用途。

進(jìn)一步地，本發(fā)明提供了一種CHIP蛋白作為區(qū)分正常人、胰腺良性腫瘤和胰腺癌患者的有效的血清學(xué)標(biāo)志物中的用途。

進(jìn)一步地，本發(fā)明提供了一種CHIP蛋白作為區(qū)分胰腺良性腫瘤、胰腺內(nèi)分泌腫瘤與正常人的有效的血清學(xué)標(biāo)志物。進(jìn)一步地，所述的試劑盒用于ELISA方法中。

另一方面，本發(fā)明提供了CHIP蛋白在制備用于評(píng)估胰腺癌患者預(yù)后的試劑盒中的用途。