[發(fā)明專利]酸棗仁安神催眠活性皂苷組分及其分離純化方法與應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310172382.1
• 申請日: 2013-05-10
• 公開（公告）號: CN103272018A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 姜建國;張?zhí)裉?/a>;陳健;許喜林;朱良
• 申請（專利權(quán)）人: 華南理工大學(xué)
• 主分類號: A61K36/725
• 分類號: A61K36/725;A61P25/20
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉;蘇運貞

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域，特別涉及酸棗仁安神催眠活性皂苷組分及其分離純化方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著社會的發(fā)展，生活節(jié)奏的加快，人們的生活中潛伏著更多對失敗的恐懼和焦慮。竟?fàn)幣c拼博，給人們的精神帶來了巨大的壓力，失眠、焦慮癥發(fā)病率急劇上升。失眠是最常見的一種睡眠障礙，對人體機能、智力以及免疫力有巨大危害。長期失眠，不僅損害人的思維活動，而且會影響人的免疫系統(tǒng)，最終會縮短生命。在臨床上常用具有鎮(zhèn)靜催眠作用的化學(xué)合成藥物治療失眠。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，約44%的患者長期服用苯二氮卓類（BDZ）和巴比妥類催眠藥物，但這些藥物因具有副作用及成癮性使其應(yīng)用受到限制。巴比妥鈉類藥物隨劑量逐漸增加而產(chǎn)生鎮(zhèn)靜、催眠、嗜睡、抗驚厥和麻醉作用，中毒劑量可致呼吸麻痹而死亡。中醫(yī)藥具有良好安神鎮(zhèn)靜作用，而且不良反應(yīng)少，具有不成癮，也不會產(chǎn)生依賴性、耐受性等顯著優(yōu)點，具有廣闊的應(yīng)用前景。

已有前人對酸棗仁中的黃酮、皂苷、油脂和生物堿等分別進行催眠活性的研究。但各研究結(jié)果之間存在一些差異，例如郭勝民等（中藥材.1998，（21）11：578～579;西北醫(yī)學(xué)雜志.1996，（8）11：166～168）報道酸棗仁中總黃酮、總皂苷均具有催眠活性，Woo.Siekwoo等（Phytochemistry.1978,18:353～355）也認(rèn)為酸棗仁皂苷A為有效成分之一，但吳樹勛等（中國中藥雜志.1991，16(7)：435～437）研究發(fā)現(xiàn)酸棗仁皂甙A無中樞神經(jīng)抑制作用,相反卻能加強苯丙胺的興奮作用,認(rèn)為酸棗仁皂苷A可能不是安神作用的有效成分；袁昌魯?shù)?中藥通報.1987，12(3)：34～35)通過實驗指出黃酮類成分也是鎮(zhèn)靜催眠的有效成分之一,而石油醚提取的脂肪油無此作用，但趙秋賢等（西安醫(yī)科大學(xué)學(xué)報.1995，（16）4：421～423）研究了酸棗仁脂肪油對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響，認(rèn)為酸棗仁油也可能是鎮(zhèn)靜催眠的有效成分。但是酸棗仁中安神催眠活性成分的鑒定和分離方法對人類的健康有著重要的意義，仍有很多需要進行研究。

發(fā)明內(nèi)容

為克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點和不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種酸棗仁安神催眠活性皂苷組分的分離純化方法。該方法為一條新的、不引入具有明顯毒性溶劑和試劑的、相對安全的天然產(chǎn)物提取分離方法。

本發(fā)明的另一目的在于提供上述分離純化方法制備的酸棗仁安神催眠活性皂苷組分。

本發(fā)明的再一目的在于提供所述的酸棗仁安神催眠活性皂苷組分的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)：一種酸棗仁安神催眠活性皂苷組分的分離純化方法，包括以下的步驟：

（1）酸棗仁安神催眠活性皂苷樣品的制備：

酸棗仁經(jīng)炒制、粉碎后，過40目篩，60℃干燥24h，制備獲得酸棗仁粉；將酸棗仁粉按索式提取法用10倍質(zhì)量的石油醚在60℃～65℃脫脂4h，獲得殘渣和酸棗仁油；取出殘渣，干燥、研碎、過40目篩后獲得脫脂酸棗仁粉；將脫脂酸棗仁粉用25倍體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇在85℃～90℃條件下回流提取3h，抽濾獲得殘渣Ⅰ和醇液；將醇液在60℃下減壓蒸干至膏狀，加水溶解，并過濾除雜后獲得水溶液；向水溶液加1倍體積的水飽和正丁醇萃取，棄水層，獲取正丁醇層I；將正丁醇層I用1倍體積的0.1M的KOH溶液堿化處理，獲得堿水層和正丁醇層II；將正丁醇層II減壓蒸干，即得到粗皂苷；將粗皂苷經(jīng)過三次溶解-過濾-室溫干燥，即得到酸棗仁安神催眠活性皂苷樣品。

（2）酸棗仁安神催眠活性皂苷組分的分離純化方法：

1）柱層析分離純化

將步驟（1）制備的皂苷樣品用水配制成濃度為25mg/ml的上樣皂苷樣液，向裝有吸附劑的層析柱中上樣10ml，體積份數(shù)為60%乙醇溶液作洗脫液40ml，調(diào)節(jié)蠕動泵轉(zhuǎn)速使流速為0.5ml/min，每10ml一管收集洗脫液；從洗脫液中每管取1ml，加入1ml質(zhì)量份數(shù)為2%香草醛溶液，2ml濃硫酸，經(jīng)紫外光分光光度計掃描發(fā)現(xiàn)在507nm處有最大吸收峰的洗脫液為主峰洗脫液，將主峰洗脫液收集備用。

2）薄層層析分離純化