[發明專利]脫氫樅酸基二芳胺化合物作為熒光探針的應用

有效

• 申請號: 201310168190.3
• 申請日: 2013-05-09
• 公開（公告）號: CN103215033A
• 公開（公告）日: 2013-07-24
• 發明（設計）人: 高宏;宋湛謙;商士斌
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院林產化學工業研究所
• 主分類號: C09K11/06
• 分類號: C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙) 32249
• 代理人: 馮慧

技術領域

本發明涉系列脫氫樅酸基二芳胺化合物及其作為熒光探針在檢測腫瘤細胞中的應用，屬于生物技術領域。

背景技術

惡性腫瘤是嚴重危害人類健康的重大疾病之一，目前已成為人類死亡的主要原因，并且其發病率呈逐年上升的趨勢。若能早期發現腫瘤并及時治療，可大大提高腫瘤的治愈率。因此，對于腫瘤的早期檢測和診治已成為各國科學家關注的熱點。熒光探針以其快速、高靈敏度等特點成為探測腫瘤細胞的首選。

脫氫樅酸主要由歧化松香分離提純得到的具有三環菲骨架的二萜類一元樹脂酸。脫氫樅酸最大的特點在于骨架中芳環的存在，可以像其它芳香簇化合物一樣進行多種親電取代反應，引進取代基或活性基團。前人研究表明，一些脫氫樅酸基二芳胺、三芳胺喹啉、三芳胺苯乙烯、含氮雜環等化合物具有較好的熒光性質(H.D.Burrows,et?al.J?Fluoresc,2007,(17):701;H.D.Burrows，et?al.,J?Fluoresc.,2006,(16):227;B.Gigante,et?al.,New?J?Chem,2009,33:877)。

發明內容

本發明公開了一類脫氫樅酸基二芳胺化合物作為熒光探針的應用，是一類光穩定性好、對腫瘤細胞毒性低的熒光探針，可應用于腫瘤細胞成像。

本發明的技術方案為：一類脫氫樅酸基二芳胺化合物作為熒光探針的應用，所述的脫氫樅酸基二芳胺化合物具有如下式所示的結構：

其中R為苯基、帶供電子或吸電子取代基的芳基、喹啉基、菲基、聯苯基、蒽基中的任意一種；R₁為-H或異丙基。

供電子取代基為甲氧基、甲基、乙基、異丙基或苯基中的任意一種；所述的吸電子取代基為硝基、氰基、溴、氯、碘、三氟甲基中的任意一種。

所述的-NH-R的取代位置為12、13或14位。

所述的脫氫樅酸基二芳胺的結構為：

R為苯基、喹啉基、菲基、蒽基、聯苯基、對甲氧基苯基、對甲基苯基、對乙基苯基、對異丙基苯基、對硝基苯基、對氰基苯基、對溴苯基、對氯苯基、對碘苯基、對三氟甲基苯基中的任意一種。

所述的脫氫樅酸基二芳胺的結構為：

R為苯基、喹啉基、菲基、蒽基、聯苯基、對甲氧基苯基、對甲基苯基、對乙基苯基、對異丙基苯基、對硝基苯基、對氰基苯基、對溴苯基、對氯苯基、對碘苯基、對三氟甲基苯基中的任意一種

所述的脫氫樅酸基二芳胺的結構為：

資為苯基、喹啉基、菲基、蒽基、聯苯基、對甲氧基苯基、對甲基苯基、對乙基苯基、對異丙基苯基、對硝基苯基、對氰基苯基、對溴苯基、對氯苯基、對碘苯基、對三氟甲基苯基中的任意一種。

所述的一類脫氫樅酸基二芳胺化合物按下式反應制備：

，其中R為苯基、帶供電子或吸電子取代基的芳基、喹啉基、菲基、聯苯基、蒽基中的任意一種；R₁為-H或異丙基。

一類脫氫樅酸基二芳胺化合物作為熒光探針在探測腫瘤細胞中的應用。

其中R為苯基，帶供電子或吸電子取代基的芳基，或喹啉、菲、鹵代聯苯、蒽中的任意一種。

有益效果：

1.本發明脫氫樅酸基二芳胺化合物，激發波長在285-300nm，發射波長在360-410nm之間，熒光強度較高。

2.本發明化合物，具有較好的光穩定性和較低的細胞毒性。

3.本發明化合物，可被多種腫瘤細胞所吸收，并能熒光成像。

附圖說明

圖1化合物L1的光穩定性。

圖2化合物L1對腫瘤細胞HeLa、SMMC-7721、SGC-7901和A549的毒性。

圖3化合物L1在腫瘤細胞HeLa、SMMC-7721、SGC-7901和A549中的熒光成像及熒光分布。

熒光探針在使用過程中，要受到熒光顯微鏡光源紫外光激發，所以需要探針較好的紫外光照穩定性。圖1是化合物L1在水相中對紫外燈照射下的熒光發射波長的變化，可以看出，化合物L1在照射30min后，其熒光發射波長藍移21nm，熒光強度降低123(a.u.),具有較好的光穩定性。