[發明專利]包含含有精氨酸和/或賴氨酸的基序的抗微生物肽

無效

• 申請號: 201310161743.2
• 申請日: 2005-08-18
• 公開（公告）號: CN103360485A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發明（設計）人: 德沃拉·奧尼爾
• 申請（專利權）人: 諾瓦生命科學有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;A61K38/17;A61P31/00;A61P33/00;A61L15/44
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

本發明提供抗微生物肽。本發明還涉及包含該抗微生物肽的藥物組合物以及該肽在治療尤其是微生物感染中的用途。

內源性抗菌肽的一重要家族，即β-防御素是由內襯高等哺乳動物的消化道、呼吸道和泌尿生殖道的上皮細胞分泌的。皮膚中的角質化細胞也生產該β-防御素。它們的主要作用是提供抵御由病原微生物通過上述途徑引起的感染的第一道重要防線。

防御素是被研究得最多的一類抗微生物肽。該類物質由具有三個二硫橋的富含半胱氨酸的分子組成。其存在于植物、昆蟲和多種哺乳動物中。在人類中存在兩類防御素，這兩類防御素在6個半胱氨酸殘基間的間距和鍵上存在不同。這兩類防御素中的第一種是α-防御素(6種類型)，其是從中性粒細胞(HNP1-4，人嗜中性肽)中分離的并且位于胃腸道的Paneth細胞中(α-防御素5和6)的。第二類，即β-防御素更長、堿性更強，并且在內襯和/或包含和/或存在于消化道、呼吸道和泌尿生殖道和皮膚中的上皮細胞和角質化細胞中的粘膜中表達。hBD1(人β-防御素1)是組成型分泌的并且人β-防御素2、3和4(hBD2、hBD3和hBD4)響應感染或炎癥而產生。細菌尤其是鞭毛菌的刺激(Harder?et?al,Nature1997;387:861)和IL1[α]和IL1[β](白細胞介素1)(Liu?et?al,J?Invest?Dermatol2002;118;275-281)引起hBD2的表達和分泌。在某些組織位置，腫瘤壞死因子α(TNF-α)和脂多糖(LPS)還也可以起誘導hBD2的表達的作用。體外實驗已經揭示，hBD2具有對抗諸如大腸埃希桿菌(E.coli)等革蘭氏陰性菌的活性，并且在較小范圍內低程度上具有抗諸如肺炎鏈球菌(Str.pneumoniae)等革蘭氏陽性菌的活性。hBD2還顯示出體外對酵母白色念珠菌(yeast?Candida?albicans)的殺滅活性。細菌刺激、TNF-α并且尤其是干擾素γ(IFNγ)誘導hBD3的表達和分泌，這些因素具有共同特性，即都為涉及炎性過程的分子。

β-防御素除了提供有效的、組成型的以及調節的廣譜固有抗微生物保護以外，這些分子，尤其是hBD2還具有通過對未成熟樹突狀細胞和記憶T淋巴細胞的趨化性影響調動免疫應答適應臂(adaptive?arm)的能力(Yang?et?al,Science1999;286:525-528)。

重要的是，有證據表明β-防御素不僅提供抵御由病原微生物引起的感染，而且對調節并維持機體必需的諸如皮膚上、胃腸道和生殖道內的共生微生物生態系統的最佳密度和多樣性起關鍵作用(Ganz,T,Nat?Rev?Immunol.20033(9):710-20)。

β-防御素的作用方式為在活性濃度下其對宿主細胞基本沒有毒性。因此，β-防御素成為用于治療廣泛感染的潛在目標。然而，在重組體系統中生產天然形式的防御素具有技術上的挑戰性，導致其產率低。此外，越來越多的證據表明，通過其趨化性作用，β-防御素是有效的炎性化合物(Yang?et?al,Science1999;286:525-528;Van?Wetering?et?al.Inflamm?Res.2002;51(1):8-15;Niyonsaba?et?al.Curr?Drag?Targets?Inflamm?Allergy2003;2(3):224-231)。這些因素一起使得天然防御素不適于治療應用。

β-防御素是高度鹽敏感的(Porter?et?al.,Infect.Immun.1997;65(6):2396-401;Bals?et?al.J?Clin?Invest.1998;102(5):874-80;Valore?et?al.,J?Clin?Invest1998;101(8):1633-42;Goldmann?et?al.,Cell1997;88(4):553-609;Singh?et?al.,Proc?Natl?Acad?Sci?USA95(25):14961-6)。由于該原因，在諸如囊性纖維化的條件下，β-防御素不能提供抗微生物保護，其中，雖然呼吸上皮響應與該疾病狀態相關的持續細菌感染而產生大量的β-防御素，但是由于跨呼吸上皮膜的離子轉運的不平衡，β-防御素失活，所述不平衡導致增加的陽離子再吸收(尤其是Na⁺)和增加的氯化物分泌Donaldson?SH?and?Boucher?RC.Curr.Opin.PuIm.Med.2003Nov;9(6):486-91;Davies?JC.Pediatr?Pulmonol?Suppl.2004;26:147-8)。