[發明專利]一種含6-溴吲哚滿二酮的荔枝螺提取物及制備方法與其抗癌應用

有效

• 申請號: 201310154561.2
• 申請日: 2013-04-27
• 公開（公告）號: CN103232378A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發明（設計）人: 林祥志;張芳;馬伏寧;張林;馬瑞娟;榮輝;林汝榕;王昭凱;楊善軍;馬勇;陳水波;柯秀蓉;李惠麗
• 申請（專利權）人: 國家海洋局第三海洋研究所
• 主分類號: C07D209/38
• 分類號: C07D209/38;A61P35/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及醫藥領域，尤其涉及一種含6-溴吲哚滿二酮的荔枝螺提取物及制備方法與其抗癌應用。

背景技術

我國因乙肝患病率高而導致原發性肝癌發病人數居高不下，約占全球肝癌病人總數的55%，是嚴重威脅我國人民健康的重大疾病之一，因此尋找和開發安全有效的抗肝癌藥物和治療手段已迫在眉睫。海洋占地球表面積的2/3，有多達21萬種已知的微生物、低等或高等動植物棲息于海洋水體，由于海洋環境的特殊性和生物多樣性，海洋生物體的代謝酶系與陸地生物有較大差別，源于海洋生物的次生代謝產物多具有獨特的生理活性，是抗腫瘤新藥開發的寶貴資源。

荔枝螺（Thais?Roeding）又稱苦螺、辣螺，為食用螺類，隸屬于軟體動物門(Mollusca)，腹足動物綱（Gastropoda），新腹足目（Neogastropoda），骨螺科（Muricidae），主要分布在東南亞、澳大利亞和墨西哥灣等地區，我國閩、浙、粵沿海有分布。荔枝螺因生殖系統易受水污染影響發生畸變，目前主要用于海洋水體的污染監測，例如廈門近海海域有機錫污染對荔枝螺的性畸變作用等。由于自然分布的地區局限性，國內外對荔枝螺天然產物的分離與活性研究相對較少，李明等用免疫組織化學定位法發現疣荔枝螺（Thais?clavigera）消化系統中存在具有鎮痛和免疫調節作用的化合物甲硫氨酸腦啡肽（Methionine-Enkephali）；Chávezc從墨西哥荔枝螺Plicopurpura?pansa，Plicopurpura?columellaris，Plicopurpura?patula鰓下腺分泌物中分離出5種揮發性的含溴生物堿，但未對其活性進行深入研究。目前關于荔枝螺抗癌方面的研究還未有報道，但對骨螺科其它種螺類的研究發現存在抗腫瘤活性成分。例如，對17種海洋軟體動物卵物質分析，其中6種骨螺科動物卵內均含鹵代吲哚生物堿，但不同種間成分有所不同，鹵代吲哚生物堿可能是骨螺科共有特色次生代謝物。從Dicathais?orbita、Hexaplex?trunculus兩種骨螺鰓下腺、生殖腺和卵囊中分離出Tyrin?purple及其前體化合物（吲哚生物堿類），體內外試驗證實具有抑菌、細胞毒性、抗癌及肌肉松弛等多種生理活性。

國內關于荔枝螺化學組分和抗腫瘤作用的研究較少，特別是對肝癌細胞的作用還未見報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種制備荔枝螺提取物的方法。

本發明提供的方法，包括如下步驟：

1）荔枝螺軟體組織用醇水溶液浸提，收集提取液，除去醇，得到產物A；

所述荔枝螺軟體組織為腮下腺、消化腺和直腸腺組織；

2）將所述產物A用有機溶液萃取，收集有機相，即得到荔枝螺提取物；所述有機溶液為正己烷或乙酸乙酯。

上述方法中，步驟1）中，所述醇水溶液為乙醇水溶液或甲醇水溶液；所述乙醇水溶液或甲醇水溶液的濃度具體為50%-100%；所述乙醇水溶液或甲醇水溶液的濃度進一步具體為80%。

上述方法中，步驟1）中，所述荔枝螺軟體組織和所述醇水溶液的配比為20g：0.5-1.5L；所述荔枝螺軟體組織和所述醇水溶液的配比具體為20g：1L；

所述除去醇的方法為減壓濃縮。

上述方法中，所述方法為如下A或B：

A方法包括如下步驟：

步驟1），所述荔枝螺軟體組織在體積百分含量為80%的乙醇水溶液中采用磁力攪拌的方式浸提，收集提取液，減壓濃縮為浸膏；

步驟2），將所述浸膏溶于水，得到浸膏水溶液；用正己烷萃取所述浸膏水溶液，收集有機相，即得到荔枝螺提取物；

B方法包括如下步驟：

步驟1），所述荔枝螺軟體組織在體積百分含量為80%的甲醇水溶液中采用超聲波的方式浸提，收集提取液，減壓濃縮為浸膏；

步驟2），將所述浸膏溶于水，得到浸膏水溶液；用乙酸乙酯萃取所述浸膏水溶液，收集有機相，即得到荔枝螺提取物。

上述方法中，A方法或B方法中：

步驟1），所述浸提的溫度為4-40°C；所述浸提的溫度具體為25°C或30°C；所述浸提為黑暗條件下進行；

所述浸提的次數為3-5次；

步驟2）中，所述萃取次數為2-3次。

A方法中，所述每次采用磁力攪拌的方式浸提的時間為1-24h；所述每次采用磁力攪拌的方式浸提的時間具體為24h；

B方法中，所述每次采用超聲波的方式浸提的時間為1-60min；所述每次采用超聲波的方式浸提的時間具體為60min；所述超聲的功率為300W。