[發明專利]一種雙通道環境雌激素免疫傳感器的制備方法及應用

有效

• 申請號: 201310138315.8
• 申請日: 2013-04-19
• 公開（公告）號: CN103235145A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發明（設計）人: 杜斌;魏琴;張森;李賀;辛曉東;吳丹;馬洪敏;于海琴;張勇
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01N27/48
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于納米功能材料、環境檢測、免疫分析及生物傳感技術領域，具體涉及一種雙通道環境雌激素電化學免疫傳感器的制備方法及應用。

背景技術

大量環境有害物質隨著人類的生產活動進入人類生活環境，對人類的健康產生極大危害。環境雌激素能夠通過影響人類腎上腺、甲狀腺等人體重要的內分泌腺體，使其不正常分泌，從而造成人體神經系統和免疫系統的功能障礙，嚴重影響人類身心健康。環境雌激素對人類生殖、發育和自身免疫性疾病影響極大，早已引起了人們的廣泛關注。

環境雌激素種類繁多，大致分為以下幾類：（1）農藥類，如狄試劑，DDT等；（2）類固醇類，如雌二醇，雌酮等；（3）多氯聯苯類，如多氯聯苯等；（4）雙酚類，如雙酚A，壬基酚等；（5）二惡英類，如TCDD等；（6）酞酸酯類，如DMP等；（7）金屬化合類，如三丁基錫。其中雌二醇、己烯雌酚、雌酮等在環境中最為常見。

雌二醇是一種人體自然分泌的激素，雖然對女性的正常發育有增進和調節作用，但過量攝入、不當攝入等對人類身體會有很大危害。另外，因為它能夠改善牲畜瘦肉比，在禽畜飼養中也有應用。這就可能造成其在肉類中的殘留，通過食物鏈而影響人類健康，造成女性過早發育，男性乳房發育，生殖系統異變，甚至有致癌作用。因此檢測水體、肉類中的雌二醇非常重要。

己烯雌酚是一類人工合成的雌性激素，它具有和雌二醇相同的藥理和治療效果。懷孕期間如若服用己烯雌酚會對胎兒的健康產生極其嚴重的影響。它會造成胎兒的畸形、性特征逆轉、腦積水等病變，并對孕婦的肝、腎、膽囊、胰腺等造成損傷。

在獸醫臨床中己烯雌酚也被用作于牲畜催情、助產等方面。己烯雌酚在食品動物中已被禁用，但還是有不法畜牧養殖商非法添加。

雌酮是雌二醇的氧化產物，其生物學作用低于雌二醇。在人體、妊娠動物和孕婦體內都有存在，它具有止血作用，但環境中的雌酮對人體肝臟、睪丸、心臟都有影響，而且會造成女性原發性或繼發性卵巢功能減退。

對于環境雌激素的檢測方法有很多，如色譜學方法，免疫學方法，電化學方法、生物分析法等，但多數需要貴重儀器，其操作復雜，檢出限高，檢測物質單一，因此，建立一種快速、簡便、靈敏、且能同時檢測多種物質的檢測方法迫在眉睫。

免疫傳感器是將免疫學方法和分析化學相結合的生物傳感器，通過抗原與抗體的特異性結合，使得它具有靈敏、選擇性高、快速、操作簡便等優點。

電化學免疫傳感器，結合了電化學方法，具有靈敏度高，選擇性好、結構簡單、操作簡便、易于小型化、可連續、快速自動化檢測分析等優點，制備了一種雙通道環境雌激素免疫傳感器，實現了兩種環境雌激素的同時檢測。

納米材料在光學、熱學、電學、磁學、力學以及化學方面的特殊性質，使其在生產、生活、科研等各方面都有很廣泛的應用。本發明利用納米材料修飾傳感器，基于其特殊的物理化學性質，從而達到修飾傳感器的目的。

石墨烯納米層（GS）具有大的比表面積，催化性能好，能有效地吸附固載抗原，增強電子傳遞等優點。氨基化介孔四氧化三鐵（AFMFe₃O₄）具有比表面積大、吸附性能好、原料低廉、制備簡單等優點，能夠穩定的固載抗體。

本發明采用石墨烯增強電極的電子傳遞能力，利用氨基化介孔四氧化三鐵吸附金屬離子，區分標記環境雌激素抗體，從而增大檢測信號，并實現了兩種環境雌激素的同時檢測。

經對現有專利技術的檢索發現，目前CN102323323A公開了一種17β-雌二醇分子印跡膜電化學傳感器的制備方法，CN101059480A公開了一種玻碳電極修飾的電化學檢測方法，其靈敏度低于電化學免疫方法。

CN101639478A公開了一種利用磁微粒化學發光免疫技術檢測雌二醇的試劑盒。?CN102262125A公開了一種檢測己烯雌酚的電化學免疫傳感器的制備方法及應用，實現對一種雌激素的檢測。

本發明提供了一種雙通道環境雌激素免疫傳感器的制備方法及應用，實現了兩種環境雌激素的同時檢測。

發明內容

本發明的目的之一是提供一種雙通道環境雌激素免疫傳感器的制備方法。

本發明的目的之二是將所制備的雙通道免疫傳感器，用于同時檢測兩種環境雌激素。

本發明的技術方案，包括以下步驟。

1.?一種雙通道環境雌激素免疫傳感器的制備方法，包括以下步驟：

（1）氨基化介孔四氧化三鐵（AFMFe₃O₄）的制備