[發明專利]一種棉花Gh FPF1蛋白及其編碼基因和應用

有效

• 申請號: 201310136123.3
• 申請日: 2013-04-18
• 公開（公告）號: CN103183732A
• 公開（公告）日: 2013-07-03
• 發明（設計）人: 喻樹迅;王小艷;范術麗;宋美珍;龐朝友;魏恒玲
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院棉花研究所
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C12N15/29;C12N15/84;C12N5/10;C12N1/21;C12N15/11;A01H5/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種棉花蛋白及其編碼基因和應用。?

背景技術

短季棉的推廣是解決我國糧棉爭地、保證糧食安全的重要途徑。早熟型是棉花品種的重要性狀之一，而花期是衡量棉花熟性的重要指標之一。?

花是植物的次生器官，高等植物的地上部分來自莖端分生組織(shoot?apical?meristem，SAM)，即位于莖頂端的一群未分化的小細胞，莖端分生組織進而發育成莖、葉、花序分生組織及花分生組織。開花決定過程是植物生殖生長啟動的第一個階段，是花發端和花器官形成的基礎，所以開花決定過程直接控制作物生育期的早晚。因此克隆棉花開花相關基因，對其進行表達分析和轉基因功能驗證，為短季棉育種提供優質的基因資源。?

發明內容

本發明的一個目的是提供一種蛋白，名稱為Gh?FPF1，來源于棉花(Gossypium?spp)。?

本發明所述蛋白是如下1)或2)的蛋白：?

1)序列表中的SEQ?ID?№.2所示的氨基酸序列組成的蛋白質；?

2)將序列表中的SEQ?ID?№.2的氨基酸殘基序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物開花相關的由1)衍生的蛋白質。?

序列表中SEQ?ID?№.2所示的氨基酸序列由109個氨基酸殘基組成。?

上述1)和2)中的Gh?FPF1蛋白可人工合成，也可先合成其編碼基因，再進行生物表達得到。上述1)和2)中的Gh?FPF1蛋白的編碼基因可通過將序列表中SEQ?ID?№.1的第8-334位核苷酸所示的DNA序列缺失一個或幾個氨基酸殘基的密碼子，和/或進行一個或幾個堿基對的錯義突變后得到。?

編碼所述Gh?FPF1蛋白的核酸分子也屬于本發明的保護范圍。?

所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因組DNA或重組DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA、hnRNA或tRNA等。?

本發明的又一個目的是提供所述蛋白的編碼基因。?

所述編碼基因具有下述核苷酸序列之一：?

1)序列表中SEQ?ID?№：1第8-334位的核苷酸序列；?

2)編碼序列表中SEQ?ID?№：2蛋白質序列的多核苷酸序列；?

3)在高嚴謹條件下可與序列表中SEQ?ID?№：1限定的DNA序列雜交的核苷酸序列；?

4)與1)或2)或3)限定的DNA序列具有90％以上同源性，且編碼相同功能蛋白質的DNA序列；具體的，所述同源性為95％以上；再具體的為96％以上；再具體的為97％以上；再具體的為98％以上；再具體的為99％以上。?

上述高嚴謹條件可為用6×SSC，0.5％SDS的溶液，在65℃下雜交，然后用2×SSC，0.1％SDS和1×SSC，0.1％SDS各洗膜一次。?

其中，序列表中的SEQ?ID?№：1由401個核苷酸組成，其開放閱讀框架(ORF)為自5′末端第8-334位核苷酸，編碼序列表中SEQ?ID?№：2所示的蛋白質，即本發明所述的Gh?FPF1蛋白。?

含有上述核酸分子的重組載體、表達盒、轉基因細胞系或重組菌也屬于本發明的保護范圍。?

所述重組載體可為重組表達載體，也可為重組克隆載體。?

所述重組表達載體可用現有的表達載體構建。所述表達載體還可包含外源基因的3’端非翻譯區域，即包含聚腺苷酸信號和任何其它參與mRNA加工或基因表達的DNA片段。所述聚腺苷酸信號可引導聚腺苷酸加入到mRNA前體的3’端。使用所述基因構建重組表達載體時，在其轉錄起始核苷酸前可加上任何一種增強型、組成型、組織特異型或誘導型啟動子，它們可單獨使用或與其它的啟動子結合使用；此外，使用本發明的基因構建重組表達載體時，還可使用增強子，包括翻譯增強子或轉錄增強子。為了便于對轉基因植物細胞或植物進行鑒定及篩選，可對所用植物表達載體進行加工，如加入在植物中表達可產生顏色變化的酶或發光化合物的基因(GUS基因、GFP基因、螢光素酶基因等)、具有抗性的抗生素標記物(慶大霉素標記物、卡那霉素標記物等)或是抗化學試劑標記基因(如抗除莠劑基因)等。從轉基因植物的安全性考慮，可不加任何選擇性標記基因，直接以逆境篩選轉化植株。?

擴增本發明所述編碼基因全長或其任意片段的引物對也屬于本發明保護的范圍。?

本發明的另一個目的是提供本發明所述蛋白、編碼基因和含有所述編碼基因的重組載體、表達盒、轉基因細胞系或重組菌在如下1)-3)至少一種中的應用：?