[發明專利]一種用于水稻浸種和葉面噴施的殼寡糖的制備方法

無效

• 申請號: 201310132309.1
• 申請日: 2013-04-17
• 公開（公告）號: CN103194510A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 梁運祥;蘇一龍
• 申請（專利權）人: 肇慶長龍生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/26
• 分類號: C12P19/26
• 代理公司: 北京市廣友專利事務所有限責任公司 11237
• 代理人: 李晶

1.一種用于水稻浸種和葉面噴施的殼寡糖的制備方法，其特征在于，它的工藝步驟包括：a、以殼聚糖為原料；b、制備殼聚糖膠體溶液，以水為溶劑，并添加乙酸促溶；c、纖維素酶酶解，在殼聚糖膠體溶液中添加纖維素酶，控制溫度、pH進行酶解，酶解結束后加溫滅酶；d、殼聚糖酶接替酶解，在纖維素酶酶解基礎上添加殼聚糖酶，控制溫度、pH進行酶解，酶解結束后加溫滅酶；e、成品處理。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的殼聚糖膠體溶液制備過程是按照所需殼聚糖濃度要求和殼聚糖溶液體積量取生產用水，將原料殼聚糖加水溶脹，之后添加乙酸促進殼聚糖溶解，至殼聚糖完全溶解后，再用乙酸鈉調節至所需pH值。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的纖維素酶為利用黑曲霉、里氏木霉或綠色木霉發酵生產的纖維素酶；所述的殼聚糖酶為利用Mitsuaria?sp，枯草芽孢桿菌，短小芽孢桿菌或煙曲霉發酵生產的殼聚糖酶。

4.按權利要求1-3之一所述的方法，其特征在于，所述的殼聚糖膠體溶液濃度為1%-10%，所述的殼聚糖溶液的pH為3-7。

5.根據權利要求1-3之一所述的方法，其特征在于，所述的纖維素酶添加量為10-50單位/g殼聚糖，酶解溫度為37℃-55℃，酶解時間為3-8小時，滅酶溫度為100℃，維持1分鐘；所述的殼聚糖酶添加量為5-10單位/g殼聚糖，酶解溫度為37℃-55℃，酶解時間為5-10小時，滅酶溫度為65℃，維持5分鐘。

6.一種用于水稻浸種和葉面噴施的殼寡糖的制備方法，其工藝步驟如下：

1）、備料：以市售殼聚糖為原料，需符合如下質量要求：

由蝦或蟹外殼加工生產而成，殼聚糖含量>?95%（干基），外觀為白色粉末，脫乙酰度>85%，pH?7.0-8.0，干燥失重<8.0%，灼燒殘渣<1.0%，不溶物<1.0%，重金屬（以Pb計）≤10ppm，砷≤0.5ppm，菌落總數≤1000?cfu/g，粒度40目-80目；

2）、殼聚糖膠體溶液制備：

制備濃度為1%-4%的殼聚糖水溶液：稱取殼聚糖原料，加入到其質量10-20倍的水中，靜置溶脹30分鐘后，所述的乙酸促溶時的乙酸添加量為每1g殼聚糖中加入濃度為10?mol/L的乙酸溶液1?mL，持續攪拌至殼聚糖完全溶解，再加水調整到所需殼聚糖濃度并使用乙酸鈉調節pH為3-7；

3）、初級酶解：

將殼聚糖溶液升溫至37℃-55℃，按照每克殼聚糖底物添加10-50單位纖維素酶，酶解溫度37℃-55℃，酶解pH3-7，酶解時間為3-8小時；酶解結束后，升溫至100℃并維持1分鐘，然后迅速冷卻至次級酶解所需溫度；

4）、次級酶解

經過初級酶解的殼聚糖酶解溶液，按照每克殼聚糖原料加入5-10單位的殼聚糖酶，維持溫度37℃-55℃，酶解pH3-7，保溫酶解5-10小時，酶解結束后，升溫至65℃并維持5分鐘，然后迅速冷卻至室溫；最終酶解產物中2500-3000分子量的產物質量占總質量的70%或以上；

5）、成品處理

檢驗合格的殼寡糖最終酶解液加入防腐劑或適當稀釋后加入防腐劑后進行灌裝或濃縮后噴霧干燥制成干粉再進入檢驗、包裝工序。

7.根據權利要求6所述的一種用于水稻浸種和葉面噴施的殼寡糖的制備方法，首先配制濃度為1%的殼聚糖膠體溶液：稱取5?kg殼聚糖粉末，與100?L蒸餾水混合，溶脹30?min后，向其中加入濃度為10?mol/L的醋酸5?L，持續攪拌約2?h，至完全溶解，溶液用10?mol/L的NaAc調至pH3，加水至500?L，即得濃度為1%，pH為3的殼聚糖膠體溶液；初級酶解：纖維素酶添加量為10單位/克，酶解溫度45攝氏度，酶解時間5小時；將溫度升溫至100攝氏度1分鐘進行滅酶，然后降溫至50攝氏度；次級酶解：按照5單位/克底物加入殼聚糖酶，溶液pH不變，酶解溫度50攝氏度，酶解時間為8小時；酶解結束后，升溫至65攝氏度5分鐘進行滅酶；酶解最終結果殼寡糖平均分子量2500道爾頓，分子量小于3000產物占總質量55%。