[發明專利]一種綠臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM及其編碼序列的基因與應用

有效

• 申請號: 201310131314.0
• 申請日: 2013-04-16
• 公開（公告）號: CN103193876A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 周江;凌桂英;高久香;李莉;王義鵬
• 申請（專利權）人: 貴州師范大學
• 主分類號: C07K14/46
• 分類號: C07K14/46;C12N15/12;A61K38/17;A61K8/64;A61P39/06
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 李亮;程新敏

技術領域

本發明涉及分子遺傳學領域，尤其是一種綠臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM及編碼序列的基因與應用。?

背景技術

任何包含一個未成對電子的原子或原子團，均稱之為自由基。生物體系主要遇到的是氧自由基，例如超氧陰離子自由基、羥自由基、過氧化氫、脂質過氧自由基、二氧化氮自由基、一氧化氮自由基、單線態氧和臭氧。細胞內的自由基來源包括紫外線的照射，電離輻射，藥物，環境毒素，黃嘌呤氧化酶，內質網上的細胞色素P-450酶類和質膜NADPH氧化酶等。線粒體內膜上的氧化呼吸鏈被認為是細胞內氧自由基的主要來源。在較高濃度下，活性氧自由基對生物細胞的細胞結構、核酸、脂類和蛋白質造成損傷。造成DNA損傷，進一步引起復制錯誤、基因組不穩定、轉錄意外起始或終止，從而導致生物體變異或疾病發生；引起細胞膜流動性和通透性改變，導致細胞結構和功能改變；引起蛋白質氧化，導致蛋白質變性和失活。?

目前一些變異實驗表明，慢性的氧化損傷尤其是來自炎癥的慢性氧化損傷跟腫瘤發生有關。例如，潰瘍性結腸炎常常伴隨高發的結腸直腸癌。在自由基與神經系統疾病方面，由于大腦用氧量極高，外加富含多不飽和脂肪酸和參與氧化還原反應的金屬離子如鐵和銅，導致大腦成為容易被氧離子自由基攻擊的器官。抗氧物目前在國內外應用廣泛,?需求量逐漸增多,?現在被用于預防治療多種疾病,?如心血管疾病、腫瘤、關節炎、腎功能損傷、糖尿病、自身免疫性疾病等。此外，抗氧化物近年在化妝品領域的應用興起,尤其是天然抗氧化物。由于皮膚的光老化作用是由于紫外線誘導皮膚細胞產生大量的氧自由基堆積而造成的。現在許多護膚品中加入抗氧化劑,?有減少雀斑、防輻射、延緩衰老、調節免疫和提高皮膚自我保護的作用。?

關于衰老的學說有很多種，其中自由基學說是較為廣泛認可的一種。有研究發現氧氣消耗和衰老之間存在聯系，例如低耗氧可以解釋為什么蜂王壽命能比會飛的工蜂壽命長50倍；大型動物單細胞耗氧量平均比小型動物細胞少所以壽命一般較長；長壽物種的抗氧化系統往往較為強大，如動物中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、谷胱甘肽、類胡蘿卜素類和維生素E含量較高。?

除此之外，活性氧自由基還與多種人類疾病有關，如心腦血管疾病、缺血再灌注損傷、類風濕性關節炎和糖尿病等。?

為了抵抗活性氧自由基對機體的損害，在漫長的進化過程中生物體形成多種不同的自由基清除系統，包括非基因編碼的小分子物質，如尿酸、維生素C、維生素E、胡蘿卜烯類、硫辛酸和輔酶Q等；基因編碼的大分子抗氧化酶類，如超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶、過氧化物酶、硫氧還蛋白酶系統和谷胱甘肽酶系統；基因編碼的小分子抗氧化肽類，如從兩棲類蛙科動物皮膚中發現的各種小分子抗氧化多肽。各種不同類型的自由基清除劑在醫藥和化妝品領域具有極大的應用潛力，如維生素C、超氧化物歧化酶(SOD)和小分子抗氧化多肽。?

綠臭蛙（Rana?margaratae)屬于兩棲綱無尾目蛙科臭蛙屬。目前關于綠臭蛙來源抗氧化多肽的研究還沒有報道。?

發明內容

技術要求?

本發明所要解決的技術問題是提供一種綠臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM。

本發明還要解決的技術問題是提供上述蛋白的編碼序列。?

本發明還要解決的技術問題是提供上述蛋白在制備抗氧化藥物或化妝品添加劑的應用。?

本發明是這樣實現的：一種綠臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM，它是具有序列表中SEQ?ID?NO：1所示的氨基酸序列的蛋白，或者是將SEQ?ID?NO：2的氨基酸殘基序列經過一個以上氨基酸殘基的取代、缺失或添加，且具有與SEQ?ID?NO：2的氨基酸殘基序列相同活性的由SEQ?ID?NO：2衍生的蛋白質。?

所述的綠臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM具有序列表中SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列；該綠臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM為直鏈多肽，含有27個氨基酸殘基，分子量為2995.71????Da，等電點為9.78。?

綠臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM的編碼基因，它是下列核苷酸之一：?

（1）序列表中SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列；

（2）編碼序列表中SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列的多核苷酸；

（3）在高嚴謹條件下可與序列表中SEQ?ID?NO：1限定的核苷酸序列雜交的核苷酸序列。