[發(fā)明專利]節(jié)桿菌谷氨酰胺合成酶基因、其編碼蛋白及其克隆方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310127901.2
• 申請日: 2013-04-15
• 公開（公告）號: CN103205440A
• 公開（公告）日: 2013-07-17
• 發(fā)明（設計）人: 朱晨光;王偉;沈春磊;李朝斌;俞頔;唐遠平;梅冰;宋任濤
• 申請（專利權）人: 上海大學
• 主分類號: C12N15/52
• 分類號: C12N15/52;C12N9/00;C12N15/63;C12N15/10
• 代理公司: 上海上大專利事務所(普通合伙) 31205
• 代理人: 陸聰明

1.?一種節(jié)桿菌谷氨酰胺合成酶基因，其特征在于該基因的序列為SEQ?ID?NO.1所示的堿基序列。

2.一種根據權利要求1所述的基因編碼的蛋白，其特征在于該蛋白的序列為SEQ?ID?NO.2所示的氨基酸序列。

3.一種重組表達載體，該重組載體含有根據權利要求1所述的基因。

4.一種宿主細胞，該宿主細胞含有根據權利要求3所述的重組載體。

5.一種克隆根據權利要求1所述的節(jié)桿菌谷氨酰胺合成酶基因的方法，其特征在于該方法的具體步驟為：參考NCBI數據庫中的節(jié)桿菌屬細菌的谷氨酰胺合成酶基因序列，設計兼并引物，再從土壤微生物宏基因組DNA中PCR擴增出了一個谷氨酰胺合成酶基因；所述的兼并引物為：Ar2F:?5’-ATGTTYAAGACTGCGGACGA-3’和Ar2R:?5’-CTAGACGCCGTAGTAGAGCT-3’。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于所述的PCR擴增的條件為：94℃?5分鐘；94℃?50秒，54℃?50秒，72℃?1分30秒，25個循環(huán)；72℃?8分鐘。