[發明專利]一種寡養單胞菌及其在降解啶蟲脒中的應用

有效

• 申請號: 201310121725.1
• 申請日: 2013-04-09
• 公開（公告）號: CN103571769A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 許平;唐鴻志;胡海洋;李健;陶飛
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A62D3/02;C12R1/01;A62D101/04;A62D101/26
• 代理公司: 上海旭誠知識產權代理有限公司 31220
• 代理人: 鄭立

技術領域

本發明涉及一種寡養單胞菌，尤其涉及一種能降解啶蟲脒的寡養單胞菌。?

背景技術

啶蟲脒(Acetamiprid)屬于氯化煙酰亞胺類新型高效殺蟲劑，于1996年由日本曹達株式會社開發并商品化，是繼吡蟲啉、烯啶蟲胺之后的第三個新煙堿類殺蟲劑。啶蟲脒是一種新型甲基乙酰胺類殺蟲劑，具有觸殺、胃毒、滲透和內吸等殺蟲作用，高效、安全、廣譜，對半翅目、鱗翅目、鞘翅目等有效，具有活性高、持效期長、用量少、內吸性強等優點。啶蟲脒作為一種神經性殺蟲劑，是煙酸乙酰膽堿酯酶受體的作用體，能選擇性抑制昆蟲神經系統中乙酰膽堿酯酶的受體，表現出與這一受體的極高競爭性結合能力，可抑制煙酸乙酰膽堿的傳遞，干擾害蟲的神經系統化學信號的傳遞，破壞昆蟲中樞神經的正常傳導，從而導致昆蟲麻痹并最終死亡。?

隨著對該殺蟲劑研究的不斷展開，該殺蟲劑的毒性日益顯現。Hassani等在其研究中指出，啶蟲脒低濃度下會影響蜜蜂對刺激的靈敏度以及損傷蜜蜂的長期記憶。Kocaman等報道指出，體外實驗中啶蟲脒顯示出了對人體外周血淋巴細胞的基因毒性以及細胞毒性：25-40μg/ml濃度的啶蟲脒處理24及48小時，會顯著誘發人體外周血淋巴細胞的姐妹染色單體交換以及染色體畸變，同時使用30-40μg/ml啶蟲脒會顯著誘導細胞微核的產生，表明了啶蟲脒會誘發DNA損傷。因而有必要研究該殺蟲劑高效降解和轉化方法，減少其在環境中殘留，降低對益蟲及人類危害的目的。?

微生物轉化是利用微生物代謝過程中產生的酶系對底物的某一特定部位進行有機反應，在微生物體內或體外促進天然的和人工合成的化學分子的諸多轉化反應，反應條件溫和、專一性強、高效環保。由于微生物種類繁多、繁殖速度快、代謝能力強等優點，可以考慮使用微生物轉化技術降低農殘中啶蟲脒的含量，并轉化獲得高值新型農藥，減少對益蟲及人類的潛在危害。?

發明內容

本發明的目的是提供一種能高效降解啶蟲脒的寡養單胞菌及其在降解啶蟲脒中的應用，所述寡養單胞菌能將有毒的啶蟲脒降解為無毒的化合物，保護了環境，且使用方法簡單、經濟、無二次污染。?

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：?

一種寡養單胞菌，菌名為寡養單胞菌(Stenotrophomonas?sp.)XP，已于2010年12月31日保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC)，其保藏登記號為CCTCC?NO：M2010375。中國典型培養物保藏中心地址：中國，武漢，武漢大學；郵編：430072。?

所述寡養單胞菌(Stenotrophomonas?sp.)XP，來源于生產啶蟲脒農藥廠的上壤樣品、排污口水樣，經富集培養、分離得到。?

所述寡養單胞菌(Stenotrophomonas?sp.)XP，菌落成半透明乳白色或乳白色，菌落濕潤、邊緣整齊，多為規則圓形菌落，該菌為一株革蘭氏陰性菌，具有極生鞭毛，菌體為短桿狀，長約為1μm，寬約為0.5μm，結果見圖1。使用16S?rDNA基因序列分析，結果顯示該菌與假單胞菌屬(Pseudomonas?sp.)及寡養單胞菌屬(Stenotrophomonas?sp.)細菌相似性最高，同時進化樹分析結果指出，該菌與寡養單胞菌(Stenotrophomonas?sp.)進化距離更進，結果見圖2。之后針對假單胞菌與寡養單胞菌氧化酶反應實驗的不同設計實驗，結果指出，該菌為氧化酶反應陰性，與寡養單胞菌(Stenotrophomonas?sp.)反應結果一致。?

本發明所述的高效降解啶蟲脒寡養單胞菌(Stenotrophomonas?sp.)XP，在添加1g/L酵母粉的無機鹽培養基中，菌體初始濃度OD600nm為0.04，能夠在26小時的培養過程中將1g/L啶蟲脒降解完全，結果見圖3。?