[發明專利]一種分離/富集食品中痕量環丙沙星的方法

無效

• 申請號: 201310120797.4
• 申請日: 2013-04-09
• 公開（公告）號: CN103191581A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 閆永勝;陳波;韓娟;逯洋;王赟
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: B01D11/04
• 分類號: B01D11/04;G01N30/89
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

技術領域

本發明屬于環境分析技術領域，涉及一種分離/富集食品中痕量環丙沙星(CIP)的新方法，特指以環氧乙烷與環氧丙烷的無規共聚物（EOPO）為萃取劑，以無機鹽磷酸氫二鉀(K₂HPO₄)作為分相的鹽析劑，形成雙水相體系（ATPS）分離/富集食品中痕量環丙沙星的方法。

背景技術

環丙沙星是全合成的第三代哇諾酮類抗菌藥,?具有抗菌譜廣,?內在活性高,?穿透力強,?與其他抗菌藥不易產生交叉耐藥等特點,?因而臨床上已廣泛應用于各種全身感染。同時，從細菌核深處破壞了細菌的代謝和增殖，能迅速把細菌殺死，殺菌效果穩定，也廣泛用于水產養殖中疾病的治療，成為水產養殖中最重要的抗感染藥物之一。但是，由于環丙沙星廣泛的使用，在水產動物體內的殘留增強了致病菌的耐藥性，直接威脅公共衛生安全和生物安全、污染了自然環境，對人可以引起皮膚過敏、心動過速、胃腸道反應、光敏性皮膚病等副作用。美國等國家將其列入禁止在食品動物使用的獸藥及其化合物清單。為了消費者健康，必須監控各種水產品藥物殘留，為此需要可靠的分析方法來監測這些藥物殘留。

樣品分析最重要的環節是樣品的前處理，它對分析方法的可靠性、準確性有重要影響。由于環境樣品具有被測物濃度低、組分復雜、干擾物多，故一般都要經過前處理才能進行分析測定。目前，環丙沙星類抗生素殘留的前處理方法主要為液-液萃取法、固相萃取法、基質固相分散萃取法、固相微萃取法、超臨界萃取法、加壓溶劑萃取法、超聲波提取法和雙水相萃取法。其中最常用的是固相萃取法，但是固相萃取使用有機溶劑，對環境污染較大，并且解吸附過程操作非常耗時。因此，需要建立一種高效、無毒、無污染的綠色分離/富集方法。

雙水相體系是一類新型萃取分離體系，它是由兩種聚合物或一種聚合物和一種鹽的水溶液在一定濃度下混合自發形成的兩相體系，具有無毒、無污染、萃取條件溫和、樣品易分離、操作簡單等優點。與傳統的雙水相萃取體系相比，功能性聚合物-鹽雙水相體系使用的溫敏性聚合物成本低且易于溫度分離回收，分相時間短，萃取組分可以循環利用，達到綠色化學的目的。

1955年由Albertson首先利用雙水相技術來分離生物分子，在隨后的幾十年中，這項技術有了長足的發展。近幾年來，雙水相技術在動力學研究、雙水相親和分離、多級逆流層析、反應分離耦合等方面都取得了顯著的成績。由于其操作條件溫和、有機溶劑用量少、可調節因素多及易于工業化放大和操作等，廣泛用于物質的提取和分離富集。

發明內容

本發明建立了一種全新的樣品前處理體系—溫敏性聚合物/鹽雙水相體系?(ATPS)。該方法將溫敏性聚合物EOPO與鹽兩相混合，它利用了表面活性劑在溫度改變的情況下與水相親和度改變的性質，結合無機鹽形成雙水相體系進行萃取分離的一種新的分離技術。這種新型的分離體系集雙水相萃取優點，同時由于溫敏性聚合物的溫度分離性質，實現了二次萃取，使得萃取效率比一次萃取更高，同時相組分的回收利用，降低了實驗成本。

本發明采用的技術方案是：

功能性聚合物鹽雙水相體系分離/富集食品中環丙沙星(CIP)，是以低成本的溫敏性表面活性劑EOPO作為萃取溶劑，以磷酸氫二鉀(K₂HPO₄)作為鹽析劑對環丙沙星進行分離/富集的方法。

本發明具體步驟：一種分離/富集食品中痕量環丙沙星的方法，按照下述步驟進行：

（1）在磨口離心管中，首先加入分相鹽溶液，再加入100ng/mL環丙沙星標準溶液，最后加入質量濃度為80%的EOPO溶液，其中試液體積V_{環丙沙星標準溶液}：V_{分相鹽溶液}:V_eopo:V_總體積=（0.5：6.5：3:10）；其中V_總體積即雙水相體系總體積，分相鹽溶液為質量濃度為55%K₂HPO₄；