[發明專利]一種裂褶菌胞外多糖與燕麥多糖組成的復合多糖的制備方法

無效

• 申請號: 201310120106.0
• 申請日: 2013-04-09
• 公開（公告）號: CN103160550A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發明（設計）人: 徐寶軍
• 申請（專利權）人: 徐寶軍
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04
• 代理公司: 寧波市天晟知識產權代理有限公司 33219
• 代理人: 張文忠

技術領域

本發明涉及一種復合多糖的制備方法，具體地說是指一種裂褶菌胞外多糖與燕麥多糖組成的復合多糖的制備方法。

背景技術

近年來隨著人們對多糖研究的深入，發現多糖具有相當多的生理功能，如免疫調節、抗氧化、抗腫瘤、抗凝血活性、降血糖、降血脂、抗缺氧等。

多糖來源廣泛，大多源于動物、植物、微生物和海藻中。不同的多糖具有不同的生物活性，但一般來說，真菌多糖具有較高的抗腫瘤活性，高等植物多糖具有較好的免疫促進作用。因此近年來真菌多糖與植物多糖逐漸受到重視。其中裂褶菌（Schizophyllum?commune?Fr.）多糖、燕麥多糖越來越受到市場的青睞，在醫藥市場、保健品市場、化妝品市場前景廣闊。

?然而裂褶菌子實體的培養，需要至少二至三個月；培養至采收耗時耗力，野外采集更為困難；源于子實體的多糖提取也工藝復雜，成本高昂。因此目前多利用液態發酵培養菌絲體生產多糖，以深層培養方式制造菌絲體居多。菌絲體經初步擴大，培養后，經由小到大的發酵罐逐級連續培養，借此大量生產。而不同的微生物在發酵過程中，需要均衡的營養，合適的碳氮比、溫度、PH、攪拌速率、溶氧才能快速的繁殖產生代謝產物，且生產不同的代謝產物上述條件也不盡相同，不同的代謝產物需要不同的生產條件與外部營養環境。一般情況下，發酵產物還會有不理想的顏色與氣味，影響最終產品的質量品相。

其次，因真菌菌絲體在深層培養時生長較慢，過程中遭遇污染的機會也會增加，造成損失，因此液體菌種的質量，以及接種量都將影響最終產品的質量及發酵成敗。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的現狀，提供一種裂褶菌胞外多糖與燕麥多糖組成的復合多糖的制備方法，本制備方法通過一次發酵便能夠得到同時具有裂褶菌胞外多糖與燕麥多糖優點的復合多糖，且生產周期短、工藝簡單、成本低、氣味小、色素低。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：

一種裂褶菌胞外多糖與燕麥多糖組成的復合多糖的制備方法，其中，包括以下步驟：

步驟一：菌種活化：將裂褶菌接種到PDA平板培養基上進行復壯活化培養，得到平板菌種；

步驟二：一級菌種的培養：在發酵罐中，將培養好的平板菌種，接種到種子培養基中，在搖床上培養，得到一級菌種；

步驟三：二級菌種的培養：在發酵罐中，將一級菌種接種于種子培養基中，在搖床上培養，得到二級菌種；

步驟四：菌種的液體發酵：在發酵罐中，將二級菌種接種到基礎培養基上，勻速攪拌、發酵，檢測還原糖，直到還原糖的含量為0，發酵結束，得到發酵醪；

步驟五：提取與純化：在發酵醪中加入1.5倍體積的水，在97℃至98℃的溫度下水提2h至4h，經離心后得到上清液，上清液經吸附樹脂脫色后，得到裂褶菌胞外多糖與燕麥多糖組成的復合多糖。

上述的步驟一中的PDA平板培養基的組成為：每升PDA平板培養基中含有馬鈴薯20?g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂5g，蛋白胨5g，瓊脂20g，其余為自來水。

上述的步驟二平板菌種的接種量為每100mlPDA平板培養基中接種兩塊0.5cm²的平板菌種。

上述的步驟二中一級菌種的培養溫度為27℃至28℃，培養時間為60h至72h，搖床的轉速為180rpm。

上述的步驟三中一級菌種的接種量為10%。

上述的步驟三中二級菌種的培養溫度為27℃至28℃，培養時間為60h至72h，搖床的轉速為180rpm。

上述的種子培養基的組成為每千克種子培養基中含有葡萄糖50g，磷酸二氫鉀5g，硫酸鎂2.4g，酵母膏3g，其余為自來水。

上述的步驟四中二級菌種的接種量為10%。

上述的步驟四中發酵醪的發酵溫度為27℃至28℃，發酵時間為120h至168h，攪拌速度為180rpm。

上述的基礎培養基的組成為每千克基礎培養基中含葡萄糖50g，磷酸二氫鉀5g,硫酸鎂2.4g，牛肉膏4.5g，碳酸鈣3g，燕麥麩5g，其余為自來水。

本發明的方法能廉價快速的獲得高質量的裂褶菌胞外多糖；通過配方改良，減小氣味，降低色素，減少其他代謝產物的生成，生產周期也將大大縮短。