[發(fā)明專利]一種細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用分散組合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310116981.1
• 申請日: 2013-04-07
• 公開（公告）號: CN103245786A
• 公開（公告）日: 2013-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊秋艷;朱雪梅;楊軍;王利春;王晶翼;梁隆;沈鑫;程志鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 四川科倫藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號: G01N33/579
• 分類號: G01N33/579
• 代理公司: 成都高遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，特別涉及一種細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用分散組合物。

背景技術(shù)

細(xì)菌內(nèi)毒素是G^-菌細(xì)胞壁上的特有結(jié)構(gòu)，其主要成分是脂多糖，具很強(qiáng)的熱原活性。當(dāng)細(xì)菌內(nèi)毒素通過消化道進(jìn)入人體時(shí)并不產(chǎn)生危害，但內(nèi)毒素通過注射等方式進(jìn)入血液時(shí)，則可導(dǎo)致不同程度的內(nèi)毒素血癥。因此，對于注射劑及其生產(chǎn)中所用的原輔料都應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素的控制，以確保產(chǎn)品質(zhì)量，保障用藥安全。

細(xì)菌內(nèi)毒素的檢測常用方法是家兔熱原法和鱟試劑法，目前運(yùn)用較多的是鱟試劑法。采用該方法進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測之前，須進(jìn)行干擾實(shí)驗(yàn)，排除供試品對鱟試劑實(shí)驗(yàn)的干擾，確保該方法的準(zhǔn)確度。

對于非水溶性供試品，由于其與細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用水不能互溶，混合后一段時(shí)間出現(xiàn)分層，導(dǎo)致難以有效檢測。目前多采用的方法是在分層以前取供試品與細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用水的混合物，或者通過離心取水相部分進(jìn)行干擾實(shí)驗(yàn)，但是取供試品與細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用水的混合物進(jìn)行干擾實(shí)驗(yàn)需要稀釋更大的倍數(shù)才能排除干擾甚至不能排除干擾；離心方法存在操作復(fù)雜、容易造成二次污染，出現(xiàn)假陽性，同時(shí)不能確保油相中的細(xì)菌內(nèi)毒素完全溶解在水相中，在進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測時(shí)，容易出現(xiàn)假陰性等缺點(diǎn)。對于含有這類非水溶性原料的藥品，雖然能夠與水互溶，在采用細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用水稀釋時(shí)，仍然存在細(xì)菌內(nèi)毒素在供試品中分散不均勻?qū)е赂蓴_不能成立的情況。

商君等，“油劑普魯卡因青霉素注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法的研究”，中國獸藥雜志2000，34（1）：20～22，采用在樣品中加入適量無菌、內(nèi)毒素合格的0.1mol/L氫氧化鈉、1%吐溫-80溶液，并用0.1mol/L鹽酸調(diào)節(jié)樣品液的pH值，解決了油劑普魯卡因青霉素注射液的溶解問題，但是該方法操作復(fù)雜，并且經(jīng)研究，不能廣泛應(yīng)用于常用的非水溶性藥品。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種新的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用分散組合物。

本發(fā)明細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用分散組合物，它包括如下配比的成分：甘油1～20體積份、陰離子表面活性劑0.5～5重量份，非離子表面活性劑1～10體積份。

所述重量份/體積份為g/ml。

其中，所述陰離子表面活性劑HLB值為1～20。優(yōu)選地，所述陰離子表面活性劑的HLB值為12～20。

其中，所述陰離子表面活性劑包括油酸、油酸鈉或者油酸三乙醇胺中的一種或者多種。

其中，所述非離子表面活性劑的HLB值為1～20。優(yōu)選地，所述非離子表面活性劑的HLB值為13.3～16.7。

其中，所述非離子表面活性劑包括聚山梨酯類系列中的一種或者多種。

優(yōu)選地，它包括如下配比的成分：甘油10體積份、陰離子表面活性劑1重量份，非離子表面活性劑10體積份。

本發(fā)明細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用的分散液，它包括前述述細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用的分散組合物與注射用水或細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水，其中，甘油的濃度為0.1～2%（v/v）。

本發(fā)明前述分散液的方法，它包括如下步驟：

（1）取甘油，溶于注射用水或細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水中，得甘油濃度為0.1%～2%（v/v）的溶液；

（2）分別取陰離子表面活性劑和非離子表面活性劑溶于步驟（1）的溶液中，它們的濃度分別為0.1～0.4%（w/v）和0.1～1%（v/v）；

（3）將步驟（2）得到的溶液用孔徑為100nm微孔濾膜過濾，即可。

本發(fā)明細(xì)菌內(nèi)毒素檢測用分散組合物使內(nèi)毒素均勻分散在水相中，有效排除非水溶性供試品對鱟試劑實(shí)驗(yàn)的干擾，提高內(nèi)毒素檢測方法的準(zhǔn)確度，簡化內(nèi)毒素檢測步驟。

以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

附圖說明

圖1內(nèi)毒素檢測報(bào)告，其中，管號1-8：標(biāo)準(zhǔn)曲線；9-10：離心法制備供試品溶液；11-12：陽性對照；13-14：實(shí)施例1分散液作為溶劑制備的供試品溶液1；15-16：實(shí)施例1分散液對照樣品的制備1；17-18：實(shí)施例2分散液作為溶劑制備的供試品溶液2；19-20：實(shí)施例2分散液對照樣品2；21-22：實(shí)施例3分散液作為溶劑制備的供試品溶液3；23-24：實(shí)施例3分散液對照樣品3；25-26：實(shí)施例4分散液作為溶劑制備的供試品溶液4；27-28：實(shí)施例4分散液對照樣品4；29-30：實(shí)施例5分散液作為溶劑制備的供試品溶液5；31-32：實(shí)施例5分散液對照樣品5。

具體實(shí)施方式