[發(fā)明專利]一種復合微生物菌素鹽堿地改良劑及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310114401.5
• 申請日: 2013-04-03
• 公開（公告）號: CN103320137A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳昌和;王楠;劉嘉;秦文斌;劉國輝;魏凌愷;劉會欣
• 申請（專利權(quán)）人: 清華大學;華清農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司;北京科威拜沃生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C09K17/00
• 分類號: C09K17/00;C09K101/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種復合微生物菌素鹽堿地改良劑，其特征在于，所述的該良劑包括微生物菌劑、有機液及基質(zhì)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復合微生物菌素鹽堿地改良劑，其特征在于，所述的微生物菌劑包括枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)和巨大芽孢桿菌(Bacillus?megaterium)，所述的枯草芽孢桿菌和巨大芽孢桿菌的重量份數(shù)比為：

枯草芽孢桿菌60～80

巨大芽孢桿菌20～40；

最優(yōu)的重量份數(shù)比為：

枯草芽孢桿菌70

巨大芽孢桿菌30。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的復合微生物菌素鹽堿地改良劑，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌CGMCC?7296、枯草芽孢桿菌CGMCC?7297、枯草芽孢桿菌CGMCC?7298的混合物；所述巨大芽孢桿菌為CGMCC?7337。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復合微生物菌素鹽堿地改良劑，其特征在于，所述的有機液中包括所述的微生物菌劑發(fā)酵產(chǎn)生的蛋白酶，脂肪酶，α-淀粉酶，氨基酸。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復合微生物菌素鹽堿地改良劑，其特征在于，所述的基質(zhì)包括雞糞或牛糞、褐煤、磷礦粉、麥飯石，所述雞糞或牛糞、褐煤、磷礦粉、麥飯石的重量份數(shù)比為：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的復合微生物菌素鹽堿地改良劑，其特征在于，所述的雞糞或牛糞經(jīng)過200～400℃高溫滅菌；所述的褐煤含20％的腐殖酸；所述磷礦粉、麥飯石均在300目以上。

7.一種復合微生物菌素鹽堿地改良劑的制備方法，其特征在于，所述的改良劑的制作工藝步驟如下：

所述復合微生物菌素鹽堿地改良劑由3株枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)和1株巨大芽孢桿菌(Bacillus?megaterium)發(fā)酵得到；

所述3株枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌CGMCC?7296、枯草芽孢桿菌CGMCC?7297、枯草芽孢桿菌CGMCC?7298；所述巨大芽孢桿菌為CGMCC?7337；

1)菌種準備

將所述的3株谷草芽孢桿菌和1株巨大芽孢桿菌分別在普通肉湯斜面上單獨活化，得到活化后的菌種；將所述活化后的菌種分別轉(zhuǎn)入到扁瓶中，28～30℃培養(yǎng)24h，用0.1蛋白胨無菌水溶液分別制成1號種子懸浮液、2號種子懸浮液、3號種子懸浮液、4號種子懸浮液；

2)種子罐的培養(yǎng)

將所述的1～3號種子懸浮液都接入到A種子罐，所述的4號種子懸浮液接入到B種子罐；

A種子罐中培養(yǎng)基的配方及其重量份數(shù)比為：

所述A種子罐的溫度為28～34℃，培養(yǎng)的pH為7.5～8.5；

B種子罐中培養(yǎng)基的配方及其重量份數(shù)比為：

將所述A、B種子罐在空罐時，分別在125℃/0.15mpa壓力下滅菌45分鐘，裝料后在120℃/0.11mpa下滅菌30分鐘，冷卻至35℃，500升的種子罐定容50％，所述A、B種子罐分別接種6～9×10⁸cfu，接種后在30～35℃，通氣量1∶1(v∶v)，轉(zhuǎn)速190～220r/min，罐壓0.05～0.08mpa的條件下7～9小時后，菌液中菌體達到1.0～1.5×10⁹/ml，即可移種至發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵培養(yǎng)；

3)發(fā)酵罐發(fā)酵

發(fā)酵罐的培養(yǎng)基配方及其重量份數(shù)比為：

所述發(fā)酵罐在空罐下，在125℃/0.15mpa壓力下滅菌45分鐘，裝料后在120℃/0.11mpa下滅菌30分鐘，冷卻至35℃，5000升的發(fā)酵罐定容60％；將所述的A、B種子罐培養(yǎng)后的菌液接種至所述發(fā)酵罐中，所述發(fā)酵罐的發(fā)酵溫度為28～34℃，發(fā)酵培養(yǎng)的pH為7.5～8.5；發(fā)酵4小時內(nèi)的通氣量為1∶0.5(v∶v)，4小時后通氣量增加至1∶1(v∶v)，發(fā)酵總時間為36～38小時，菌液中菌體達到0.8～1.0×10¹⁰/ml，芽孢形成率達到80％，即得到發(fā)酵后的菌液；

4)吸附于基質(zhì)

將所述發(fā)酵后的菌液與基質(zhì)充分攪拌均勻，按照20～30L/m³吸附于基質(zhì)，即得到所述的復合微生物菌素鹽堿地改良劑；

所述的基質(zhì)包括雞糞或牛糞、褐煤、磷礦粉、麥飯石的混合物。