[發明專利]一種與高血壓易感性相關的基因位點及其檢測方法

在審

• 申請號: 201310111917.4
• 申請日: 2013-04-02
• 公開（公告）號: CN104099329A
• 公開（公告）日: 2014-10-15
• 發明（設計）人: 王佐廣;彭曉云;劉潔琳;魏永祥;李梅;劉雅;文杰;許秀芳;牛秋麗;溫紹君
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學附屬北京安貞醫院
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
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技術領域

本發明涉及分子生物學和醫學領域。更具體地，涉及人線粒體融合基因2（Mfn2?gene）的單核苷酸多態性(single?nucleotide?polymorphism,?SNP)位點5’端非編碼區-1248bp的檢測。本發明還涉及檢測這個SNP位點的試劑盒。?

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背景技術

原發性高血壓（essential?hypertension,?EH）是一種多因素、多基因疾病，由環境與遺傳因素共同致病的常見而多發的心血管病癥，對人類健康造成了極大的影響。隨著分子醫學的發展，目前已經發現的高血壓相關基因已經有150余種，但是EH的發病機制仍然不完全清楚，高血壓的早期診斷和預防問題仍然未能完全解決。EH是遺傳因子和環境共同作用的結果，血壓的變化30%-60%歸因于遺傳。由于環境因素是可以控制和確認的，而對高血壓遺傳學因素卻是固定不變的。因此，對可變因素的控制，如對高血壓危險因素的預防，可以在一定程度上延緩和防止高血壓的發病，但是對固定不變的遺傳因素的認識不足卻在一定程度上嚴重影響著對高血壓發病、診斷和治療。因此對高血壓遺傳學的研究十分必要（王佐廣，溫紹君，吳兆蘇.高血壓、易感基因與單核苷酸多態性[J].高血壓雜志，2001，9：259-264）。?

近二十余年來，有關高血壓治療的研究更多地集中在對血壓的控制和對靶器官的保護，并已取得突飛猛進的發展。但是，這些手段并不能從根本上控制血壓，目前對人類內源性抗高血壓基因的研究還很少，因此，研究內源性抗高血壓機制是今后高血壓防治研究的主要方向之一，具有重要的研究價值和應用前景，如果通過調節內源性抗高血壓機制治療高血壓病，將會促進我國生物醫療技術的發展，并為我國每年節省巨大的醫療費用。?

目前所發現的高血壓相關基因，歸結起來可以概括為促高血壓基因和抗高血壓基因,Mfn2屬于后者。Mfn2的前身是我國學者陳光慧等[Chen?GH,?Zhang?CH,?Zhu?YQ,?et?al.?Expression?of?a?novel?gene?related?to?hypertension[J].?Natl?Med?J?China,?1997,?77:?823-828.]于1997年對培養的自發性高血壓大鼠（SHR）和正常Wistar?Kyoto（WKY）大鼠的血管平滑肌細胞進行差異顯示，克隆出一個新基因——增殖抑制基因（hyperplasia?suppressor?gene,HSG）。它包含有4160bp的堿基對，共編碼661個氨基酸（NM_014874,?GeneBank?Access?U41803）。后經一系列體內、體外實驗發現[Chen?KH,?Guo?XM,?Dalong?Ma,?et?al.?Dysregulation?of?HSG?triggers?vascular?proliferative?disorders[J].?Nature?Cell?Biol,?2004,?6,?872-883.]，HSG可以明顯地抑制Ras-Raf蛋白-絲裂素活化蛋白激酶基因表達，并且可以激活抗癌基因的表達，有效地阻遏細胞周期和抑制多種細胞的增殖，且這種抑制作用是通過細胞凋亡的方式實現的。因此HSG基因是原發性高血壓的候選基因之一，后經基因功能研究表明，HSG基因參與線粒體融合,因此正式命名為線粒體融合基因2(mitofusin?2,?Mfn2)。?

由于Mfn2基因在原發性高血壓患者和自發性高血壓大鼠血管和白細胞中主要的特點是出現表達下降，這應該是其表達調控出現了異常，但是目前對Mfn2基因轉錄調控方面的研究較少。5’端非編碼區是處于基因轉錄起始位點上游，2000bp以內是啟動子和主要轉錄因子存在部位，5’端非編碼區-1248bp(從起始密碼子的“A”起向上第1248位的位置，在SEQ?ID?NO:?1中為第32位核苷酸)變異正好處于這個位置。而且我們在進行序列的生物信息學分析時發現該位點位于Mfn2基因5’端非編碼區轉錄起點2000bp內，且該變異位點正好位于一個啟動子內。另外，該變異位點是一個非常重要的轉錄調控因子-轉錄激活蛋白質-1（Activator?protein-1，AP-1）的結合部位，從轉錄調控角度而言，具有非常重要的價值，因而可能具有非常重要的意義。?

綜上所述，為了最終實現治療高血壓，本領域迫切需要深入研究原發性高血壓的發病機制，尋找原發性高血壓易感基因，篩選出具有高風險的原發性高血壓患者，開發檢測原發性高血壓易感基因的方法、試劑盒，以及相關的治療藥物等。?

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發明內容