[發明專利]一種有機金屬釕綴合蛋白及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201310109645.4
• 申請日: 2013-03-29
• 公開（公告）號: CN104072607B
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 汪福意;郭偉;羅群;李鮮嬋
• 申請（專利權）人: 中國科學院化學研究所
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K14/79;A61K47/42;A61K31/28;A61P35/00
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 王鳳桐;周建秋

本發明公開了一種有機金屬釕綴合蛋白及其制備方法與應用，該方法包括：在pH值為7?8且濃度為10?100mM的緩沖溶液中，將有機金屬釕抗腫瘤藥物與血清蛋白進行接觸，所述有機金屬釕抗腫瘤藥物與血清蛋白的摩爾比為1?20：1，所述血清蛋白為氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的血清白蛋白或氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的轉鐵蛋白。通過上述技術方案，本發明獲得了靶向性強和抗腫瘤活性較高的有機金屬釕綴合蛋白，而且還為更進一步理解有機金屬釕抗腫瘤藥物的轉運機制和分子作用機理、以及以血清蛋白為載體制備納米控釋型金屬抗腫瘤藥物提供了實驗和理論依據。

技術領域

本發明涉及一種有機金屬釕綴合蛋白及其制備方法與應用，具體地，涉及一種由血清白蛋白或轉鐵蛋白與有機金屬釕抗腫瘤藥物構成的有機金屬釕綴合蛋白的制備方法以及由該方法制得的有機金屬釕綴合蛋白，以及所述有機金屬釕綴合蛋白在制備抗腫瘤藥物中的用途。

背景技術

順鉑及其它鉑類抗腫瘤藥物的成功應用刺激了無機藥物化學的發展，因此人們把目光投向了其它過渡金屬化合物的藥物活性研究，其中釕基抗腫瘤藥物活性的研究最受矚目，有機金屬釕化合物[(η⁶-arene)Ru(en)Cl]PF₆（arene=苯的同系物；en=乙二胺）已被體內體外實驗證實是一種有效的抗腫瘤候選藥物。

但是，目前的有機金屬釕化合物在體內的靶向性和抗腫瘤活性仍然較低，還遠遠不能滿足臨床應用的要求。

發明內容

本發明的目的是提供一種靶向性強和抗腫瘤活性高的由有機金屬釕抗腫瘤藥物與血清蛋白形成的有機金屬釕綴合蛋白及其制備方法與應用。

為了實現上述目的，一方面，本發明提供了一種有機金屬釕綴合蛋白的制備方法，該方法包括：在pH值為7-8且濃度為10-100mM的緩沖溶液中，將有機金屬釕抗腫瘤藥物與血清蛋白進行接觸，所述有機金屬釕抗腫瘤藥物與血清蛋白的摩爾比為1-20：1，所述血清蛋白為氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的血清白蛋白或氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的轉鐵蛋白。

另一方面，本發明提供了由上述方法制得的有機金屬釕綴合蛋白。

再一方面，本發明還提供了上述方法制得的有機金屬釕綴合蛋白在制備抗腫瘤藥物中的用途。

通過上述技術方案，本發明獲得了靶向性強和抗腫瘤活性較高的有機金屬釕綴合蛋白，而且還為更進一步理解有機金屬釕抗腫瘤藥物的轉運機制和分子作用機理、以及以血清蛋白為載體制備納米控釋型金屬抗腫瘤藥物提供了實驗和理論依據。

特別地，本發明的發明人發現，采用本申請中氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的血清白蛋白或氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的轉鐵蛋白制得的有機金屬釕綴合蛋白的抗腫瘤活性明顯高于采用其他血清蛋白（如血紅蛋白）制得的有機金屬釕綴合蛋白的抗腫瘤活性。此外，本發明的發明人還發現，在相同的條件下，除有機金屬釕化合物以外的金屬抗腫瘤化合物（如順鉑）與血清蛋白接觸后并不能獲得靶向性強和抗腫瘤活性高的金屬藥物綴合蛋白。

本發明的其他特征和優點將在隨后的具體實施方式部分予以詳細說明。

附圖說明

附圖是用來提供對本發明的進一步理解，并且構成說明書的一部分，與下面的具體實施方式一起用于解釋本發明，但并不構成對本發明的限制。在附圖中：

圖1為在激光共聚焦顯微鏡下觀察到的按照實施例1的方法制得的TMR-有機金屬釕綴合蛋白被MCF-7細胞攝取的結果圖，上圖為TMR-Tf（Tf=轉鐵蛋白）孵育后細胞中熒光標記的蛋白攝取情況圖，下圖為經按照實施例1的方法制得的TMR-Tf-6孵育后細胞中熒光標記的有機金屬釕綴合蛋白的攝取情況圖；

圖2為實施例1制得的有機金屬釕綴合蛋白Tf-3和Tf-6以及對比例4制得的順鉑綴合蛋白（Tf-順鉑）的抑制活性曲線圖；