[發明專利]一種心肌臟器保存液制備方法

有效

• 申請號: 201310103887.2
• 申請日: 2013-03-28
• 公開（公告）號: CN103238586A
• 公開（公告）日: 2013-08-14
• 發明（設計）人: 關屹;閆冬;高曉峰
• 申請（專利權）人: 遼寧億靈科創生物醫藥科技有限公司;關屹
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及醫療器械領域，具體涉及一種心肌臟器保存液HTK液及其制備工藝。

背景技術

HTK液由Bretschneider于1975年研制，是目前應用最廣泛的器官保存液，可用作心臟、腎臟、肝臟、胰腺等臟器的保存，臨床上大大提高了器官移植的成功率。

一種成功的器官保存液應滿足以下要求：減少低溫保存導致的細胞水腫；防止細胞的酸化作用；防止細胞灌洗保存過程的細胞間隙膨脹；防止氧自由基的損傷，尤其在再灌洗過程中；提供再生高能磷酸化合物底物；保持細胞內環境穩定。

HTK液具有以下特點(1)含鉀量低，故HTK液易于進入受體循環系統．且可反復或持續性原位灌洗無任何副作用及危險性；(2)含組氨酸／組氨酸-鹽酸緩沖系統．有較強的緩沖能力．且組氨酸為有效的非滲透性因子，故可防止內皮細胞腫脹；(3)含色氨酸，作為膜穩定劑．可防止組氨酸進入細胞內；(4)含甘露醇，作為羥自由基的清除劑，可防止氧自由基的損傷，同時兼有滲透支持的作用；(5)含酮戊二酸及色氨酸?作為高能磷酸化合物的底物；(6)HTK液粘度低．常溫下粘度指數為0.8，5℃時粘度指數為3.0，故更易于擴散至組織間隙，也易于在短時間內使器官降溫。

目前我國市場上的器官保護液多為進口產品，國內對此項研究日漸增多，但至今仍無一國產器官保存液經國家批準可在醫療市場流通，且進口產品需低溫保存，運輸成本高，使用不便，其中主要成分之一的2-酮戊二酸氫鉀在儲存溫度達到20℃以上1小時就降解并導致產品失去器官保護作用。因此，制備一種穩定性好、成本低、效果好的多器官保護液顯得尤為重要。

我們在研究過程中發現，2-酮戊二酸氫鉀與其他成分同時溶解配液后，所得產品穩定性較差，本發明在進口產品配方基礎上對制備工藝進行了改進，使有效成分2-酮戊二酸氫鉀更加穩定，產品在40℃下放置20天仍可保證含量穩定，避免了全程冷鏈運輸，提高了產品穩定性和安全性，降低了成本，提高了產品收益，適合于工業化生產。

發明內容

本發明在進口產品配方基礎上，對工藝進行優化，調整了2-酮戊二酸氫鉀的配液順序，并加入充氮工藝步驟，以及對滅菌參數進行優化，主要成分2-酮戊二酸氫鉀含量穩定在95%以上，其他物質含量穩定。工藝簡單，易于操作，從而保證了生產工藝的可重復性高，易于控制。?

本發明中，HTK液組分包括：氯化鈉15mmol，氯化鉀9?mmol，六水氯化鎂4?mmol，一水一鹽酸組氨酸18?mmol，組氨酸180?mmol，色氨酸2?mmol，二水氯化鈣0.015?mmol，甘露醇30?mmol?，2-酮戊二酸氫鉀1?mmol以及注射用水1000ml。

2-酮戊二酸氫鉀與其他組分混合溶解會導致含量降低，分析其可能與其它成分在部分原輔料溶解后形成的某一特定環境下發生反應，因此，本發明著重考察了2-酮戊二酸氫鉀的加入順序，有如下3種方案：

（1）將2-酮戊二酸氫鉀最先加入注射用水中溶解后，加入其它成分溶解混勻，即：2-酮戊二酸氫鉀，氯化鈉，氯化鉀，六水氯化鎂，一水一鹽酸組氨酸，組氨酸，色氨酸，二水氯化鈣，甘露醇；

（2）將所有離子物質加入注射用水中溶解后再加入2-酮戊二酸氫鉀溶解，待溶解后加入其它剩余物料溶解混勻，即：氯化鈉，氯化鉀，六水氯化鎂，二水氯化鈣，2-酮戊二酸氫鉀，一水一鹽酸組氨酸，組氨酸，色氨酸，甘露醇；

（3）將除2-酮戊二酸氫鉀外其它成分均加入注射用水溶解后，再加入2-酮戊二酸氫鉀溶解混勻，：氯化鈉，氯化鉀，六水氯化鎂，二水氯化鈣，一水一鹽酸組氨酸，組氨酸，色氨酸，甘露醇，2-酮戊二酸氫鉀。

測試結果：三種方案2-酮戊二酸中間體含量分別為：86.33%，83.43%，96.61%。

由此可知，2-酮戊二酸氫鉀在其它原輔料均溶解完全后，再加入溶解，中間體含量不再降低，因此HTK溶液配液順序確定為，將除2-酮戊二酸氫鉀外其它成分均溶解于75%體積注射用水中，再加入2-酮戊二酸氫鉀溶解，混勻。

在工藝過程中，保護樣品避免被氧化是保證樣品有效含量的重要技術，本發明采用充氮技術條件下進行配液、121℃滅菌20min，以組氨酸、色氨酸、2-酮戊二酸氫鉀在高溫60℃放置10天條件下的穩定性為考察指標，結果表明，HTK溶液在充氮保護條件下，在高溫60℃放置過程中，2-酮戊二酸氫鉀穩定性可得到顯著提高，因此HTK溶液制備工藝中選擇進行充氮保護。

表1??充氮條件下樣品組分穩定性