[發(fā)明專利]一種保加利亞乳桿菌活菌制劑的生產(chǎn)方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310099362.6
• 申請日: 2013-03-27
• 公開（公告）號: CN103283974A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李帥偉;李本濤
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州格拉姆生物科技有限公司
• 主分類號: A23K1/16
• 分類號: A23K1/16;C12N1/20;C12R1/225
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• 代理人: 暫無信息

1.一種保加利亞乳桿菌活菌制劑的制備方法包括以下步驟：

???（1）?菌種的活化與增值：

本發(fā)明采用保加利亞乳桿菌干酪亞種作為發(fā)酵菌種，菌種編號：GIM1.189，購于廣東省微生物菌種保藏中心；從平板上挑取保加利亞乳桿菌單菌落，接種到裝有20mL?MRS培養(yǎng)基（蛋白胨10.0?g，牛肉膏10.0?g，酵母膏5.0?g，檸檬酸氫二銨2.0?g，葡萄糖20.0?g，吐溫80?1.0?mL，乙酸鈉5.0?g，磷酸氫二鉀2.0?g，硫酸鎂0.58?g，硫酸錳0.25?g，蒸餾水1?000?mL，pH?6.2~6.6，高溫高壓滅菌）的試管中，37℃深層靜置培養(yǎng)12~16小時，菌液以2%的接種量接種到裝有適當(dāng)體積MRS培養(yǎng)基的三角瓶中，37℃深層靜置培養(yǎng)12~16小時備用，菌種活化一般1~3次；若培養(yǎng)基滅菌后未立即使用，則需在沸水浴中加熱10min驅(qū)氧后使用；

???（2）配制發(fā)酵培養(yǎng)基：

培養(yǎng)基包括的原料及重量份數(shù)為：豆餅粉45~55，玉米粉25~30，葡萄糖10~15，酵母浸出粉1~3，蛋白胨2~4，原料當(dāng)以克計，蒸餾水相應(yīng)以mL計的份數(shù)為800~1000，溶解，加入發(fā)酵罐內(nèi)進(jìn)行100~121℃，時間為10~30分鐘的高溫高壓滅菌，在發(fā)酵罐降溫至35~45℃時，加入無機(jī)鹽0.7~1.5g/1000mL基料，無機(jī)鹽選自CaCl₂?、MgSO_4·7H₂O及MnSO₄·H₂O中的兩種或者三種，為避免形成沉淀，在加入過程中攪拌均勻，然后加入液體石蠟至厚度為1~2cm；

???（3）控溫發(fā)酵：接入保加利亞乳桿菌液體種子的接種量為2~4%，攪拌均勻，起始pH?6.4，發(fā)酵過程中控制?pH?6.0~6.8，發(fā)酵溫度控制在37~42℃，發(fā)酵12~14個小時，放罐，將保加利亞乳桿菌培養(yǎng)物進(jìn)行菌落計數(shù)，經(jīng)過這樣發(fā)酵的活菌體濃度可達(dá)1.5~2.5×10⁹CFU/mL；

???（4）用植物淀粉吸附發(fā)酵液：以玉米粉、豆餅粉或小麥粉，或者其任意組合，作為發(fā)酵液的吸附劑；

???（5）將植物淀粉吸附的保加利亞乳桿菌發(fā)酵液混合物進(jìn)行烘干干燥，粉碎和包裝，制成用于畜禽養(yǎng)殖的微生態(tài)飼料添加劑。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保加利亞乳桿菌活菌制劑的生產(chǎn)，其特征在于所述的培養(yǎng)基：豆餅粉45~55，玉米粉25~30，葡萄糖10~15，酵母浸出粉1~3，蛋白胨2~4，原料當(dāng)以克計，蒸餾水相應(yīng)以mL計的份數(shù)為800~1000，溶解，加入發(fā)酵罐內(nèi)進(jìn)行100~121℃，時間為10~30分鐘的高溫高壓滅菌，在發(fā)酵罐降溫至35~45℃時，加入無機(jī)鹽0.7~1.5g/1000mL基料，無機(jī)鹽選自CaCl₂?、MgSO_4·7H₂O及MnSO₄·H₂O中的兩種或者三種，為避免形成沉淀，在加入過程中攪拌均勻。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保加利亞乳桿菌活菌制劑，其特征在于：培養(yǎng)溫度為37~42℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保加利亞乳桿菌活菌制劑，其特征在于：種子菌接種量為2~4%的接種量。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保加利亞乳桿菌活菌制劑，其特征在于：所用的菌種為乳桿菌屬德氏乳桿菌種保加利亞乳桿菌亞種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保加利亞乳桿菌活菌制劑，其特征在于：作為飼料添加劑應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖。