[發明專利]一種基于順磁納米Fe-Co合金探針的NMR食源性致病菌快速檢測方法

無效

• 申請號: 201310097673.9
• 申請日: 2013-03-26
• 公開（公告）號: CN103207273A
• 公開（公告）日: 2013-07-17
• 發明（設計）人: 張錦勝;唐群;賴衛華
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N24/08
• 代理公司: 南昌洪達專利事務所 36111
• 代理人: 劉凌峰

1.一種基于順磁納米Fe-Co合金探針的NMR食源性致病菌快速檢測方法，其特征步驟如下：

1）檢測目標菌的順磁納米Fe-Co合金探針的制備；

2）將目標菌特異性單克隆抗體在固相載體上的固定備用；

3）富集目標菌株，并分離：將第1步制得的順磁納米Fe-Co合金探針加入待檢樣品，充分混合震蕩，抓取目標菌后通過施加外加磁場，由于納米Fe-Co合金具有順磁特性，則Fe-Co合金探針會聚集到磁場一邊，吸走上清液則可以分離出探針，若待檢樣本中有目標菌，則被探針所富集，加少量無菌的去離子水則形成目標菌的順磁納米Fe-Co合金探針懸濁液；

4）將富集的Fe-Co合金探針懸濁液加到第2步固定了單克隆抗體的固相載體上，若存在目標菌則形成雙抗夾心，用無菌的去離子水清洗，則沒有抓取到目標菌的探針就被洗掉，若不存在目標菌，則所有探針都被洗掉；

5）之后，用洗脫劑將固定板上的雙抗夾心的探針洗下來，用外加磁場分離探針的方法用無菌的去離子水清洗掉離子和溶劑，如果還存在探針就是抓到目標菌的探針；

6）這部分探針，加入無菌的去離子水形成探針的懸濁液，進行核磁共振的弛豫時間測定，在固定場強下，無菌的去離子水的T1/T2是一個恒定值，以無菌的去離子水為空白，測得的懸濁液的弛豫時間T1/T2相比無菌的去離子水有顯著降低，則說明含有探針，從而間接證明樣本中有目標致病菌，探針的量與T1/T2的下降呈正比，可以通過加標定量探針而間接定量出目標菌的量。

2.根據權利要求1所述的基于順磁納米Fe-Co合金探針的NMR食源性致病菌快速檢測方法，其特征是所述NMR納米探針為具有順磁特性的納米級Fe-Co合金材料。

3.根據權利要求1所述的基于順磁納米Fe-Co合金探針的NMR食源性致病菌快速檢測方法，其特征是所述的目標菌的最終檢出評價方法基于核磁共振技術的弛豫時間特性參數的變化。

4.根據權利要求1所述的基于順磁納米Fe-Co合金探針的NMR食源性致病菌快速檢測方法，其特征是所述NMR弛豫時間特性，是指自旋-晶格弛豫時間(T1)和自旋-自旋弛豫時間(T2)。

5.根據權利要求1所述的基于順磁納米Fe-Co合金探針的NMR食源性致病菌快速檢測方法，其特征是所述弛豫時間特性，T1采用180°-τ-90°脈沖方法測定，T2采用CPMG序列方法測定。