[發明專利]一種用于PCR檢測的血漿miRNA制備方法有效
| 申請號： | 201310097478.6 | 申請日： | 2013-03-26 |
| 公開（公告）號： | CN103421891A | 公開（公告）日： | 2013-12-04 |
| 發明（設計）人： | 鄭曉飛;鐘一然;李珊珊;付漢江;鐵軼 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100850*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 pcr 檢測 血漿 mirna 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種血漿miRNA制備方法，其特征在于在制備血漿中的miRNA提取液中加入表面活性劑和中性鹽，該方法的主要原理是：提取液與血漿混合、加熱，在表面活性劑、中性鹽和加熱作用下，使血漿中的結合狀態miRNA游離出來，經高速離心，獲取含有miRNA分子的上清液，用于miRNA的PCR檢測。
2.權利要求1中所述的表面活性劑是壬基酚聚氧乙烯醚(NP-40)。
3.權利要求1中所述的中性鹽是氯化鈉。
4.權利要求1中所述的表面活性劑在血漿miRNA提取液中的濃度范圍是0.5％～1.5％，中性鹽在血漿miRNA提取液中的濃度范圍是0.1mol/L～0.4mol/L。
5.權利要求1中所述的加熱溫度為65℃～100℃，加熱時間為5分鐘～10分鐘。
6.權利要求1中所述的血漿miRNA制備方法中，在制備血漿miRNA過程中提取液與血漿用量的比例為體積比1∶1，血漿的用量范圍為20微升～200微升。
7.權利要求1中所述的試劑可以配制成試劑盒，試劑盒的組成包括NP-40、氯化鈉和水。
8.權利要求1中所述方法在血漿miRNAPCR檢測中的應用。
9.權利要求7中所述的試劑盒在血漿miRNA制備中的應用。
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