[發(fā)明專利]一種依賴焦磷酸的磷酸果糖激酶及其編碼基因的應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310096439.4
• 申請日: 2013-03-25
• 公開（公告）號: CN103146663A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發(fā)明（設計）人: 龍翔宇;唐朝榮;戚繼艷;陽江華;方永軍;秦云霞
• 申請（專利權）人: 中國熱帶農業(yè)科學院橡膠研究所
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12N15/54;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;王慧鳳

1.一種蛋白質，是如下1)或2)所示的蛋白質：

1）由序列表中的SEQ?ID№.1的氨基酸殘基序列組成的蛋白質；

2）將序列表中的SEQ?ID№.1氨基酸殘基序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有磷酸果糖激酶功能的由SEQ?ID№：1衍生的蛋白質。

2.根據(jù)權利要求1所述的蛋白質，其特征在于：所述蛋白質為具有磷酸果糖激酶功能的蛋白質。

3.權利要求1或2所述的蛋白的編碼基因。

4.根據(jù)權利要求3所述的編碼基因，其特征在于：所述編碼基因的cDNA核苷酸序列如下1)、2）、3）或4）所示：

1）序列表中SEQ?ID№：2的核苷酸序列；

2）序列表中SEQ?ID№：2自5′末端第221-1684位核苷酸所示的核苷酸序列；

3）在嚴格條件下可與1）或2）所述的DNA序列雜交的核苷酸序列；

4）與序列表中SEQ?ID№：2的核苷酸序列具有90％以上的同源性的且編碼蛋白具有磷酸果糖激酶功能的核苷酸序列。

5.根據(jù)權利要求3所述的編碼基因，其特征在于：所述編碼基因的基因組基因的核苷酸序列如下1)、2）、或3）所示：

1）序列表中SEQ?ID№：3的核苷酸序列；

2）在嚴格條件下可與1）所述的DNA序列雜交的核苷酸序列；

4）與序列表中SEQ?ID№：3的核苷酸序列具有90％以上的同源性的且編碼蛋白具有磷酸果糖激酶功能的核苷酸序列。

6.含有權利要求3或4或5所述的編碼基因的重組表達載體、轉基因細胞系或轉基因重組菌。

7.權利要求1所述的蛋白及其編碼基因在培育能以甘露醇為唯一碳源培養(yǎng)的轉基因工程菌中的應用。

8.權利要求1所述的蛋白及其編碼基因在培育能以甘露醇為碳源培養(yǎng)的轉基因工程菌中的應用。

9.根據(jù)權利要求7或8所述的應用，其特征在于：所述培育能以甘露醇為唯一碳源培養(yǎng)的轉基因菌株的方法或者培育能以甘露醇為碳源培養(yǎng)的轉基因工程菌的方法是將權利要求3、4或5所述的基因轉入出發(fā)菌株中，篩選得到轉基因工程菌；所述出發(fā)菌株為大腸桿菌，優(yōu)選為大腸桿菌磷酸果糖激酶缺陷株RL257；所述權利要求3、4或5所述的基因通過重組表達載體轉入出發(fā)菌株中；所述重組表達載體為將權利要求3、4或5所述的基因與pEASY-E1連接獲得的重組表達載體。

10.權利要求1所述的蛋白及其編碼基因在制備磷酸果糖激酶中的應用。