[發(fā)明專(zhuān)利]一種磷酸果糖激酶及其編碼基因的應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310095946.6
• 申請(qǐng)日: 2013-03-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103146662A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 龍翔宇;唐朝榮;方永軍;陽(yáng)江華;戚繼艷;秦云霞
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院橡膠研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N9/12
• 分類(lèi)號(hào): C12N9/12;C12N15/54;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;王慧鳳

1.一種蛋白質(zhì)，是如下1)或2)所示的蛋白質(zhì)：

1）由序列表中的SEQ?ID№.1的氨基酸殘基序列組成的蛋白質(zhì)；

2）將序列表中的SEQ?ID№.1氨基酸殘基序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有磷酸果糖激酶功能的由SEQ?ID№：1衍生的蛋白質(zhì)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)，其特征在于：所述蛋白質(zhì)為具有磷酸果糖激酶功能的蛋白質(zhì)。

3.權(quán)利要求1或2所述的蛋白的編碼基因。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的編碼基因，其特征在于：所述編碼基因的cDNA核苷酸序列如下1)、2）、3）或4）所示：

1）序列表中SEQ?ID№：2的核苷酸序列；

2）序列表中SEQ?ID№：2自5′末端第127-1554位核苷酸所示的核苷酸序列；

3）在嚴(yán)格條件下可與1）或2）所述的DNA序列雜交的核苷酸序列；

4）與序列表中SEQ?ID№：2的核苷酸序列具有90％以上的同源性的且編碼蛋白具有磷酸果糖激酶功能的核苷酸序列。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的編碼基因，其特征在于：所述編碼基因的基因組基因的核苷酸序列如下1)、2）、或3）所示：

1）序列表中SEQ?ID№：3的核苷酸序列；

2）在嚴(yán)格條件下可與1）所述的DNA序列雜交的核苷酸序列；

4）與序列表中SEQ?ID№：3的核苷酸序列具有90％以上的同源性的且編碼蛋白具有磷酸果糖激酶功能的核苷酸序列。

6.含有權(quán)利要求3或4或5所述的編碼基因的重組表達(dá)載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或轉(zhuǎn)基因重組菌。

7.權(quán)利要求1所述的蛋白及其編碼基因在培育能以甘露醇為唯一碳源培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因工程菌中的應(yīng)用。

8.權(quán)利要求1所述的蛋白及其編碼基因在培育能以甘露醇為碳源培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因工程菌中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的應(yīng)用，其特征在于：所述培育能以甘露醇為唯一碳源培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因菌株的方法或者培育能以甘露醇為碳源培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因工程菌的方法是將權(quán)利要求3、4或5所述的基因轉(zhuǎn)入出發(fā)菌株中，篩選得到轉(zhuǎn)基因工程菌；所述出發(fā)菌株為大腸桿菌，優(yōu)選為大腸桿菌磷酸果糖激酶缺陷株RL257；所述權(quán)利要求3、4或5所述的基因通過(guò)重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)入出發(fā)菌株中；所述重組表達(dá)載體為將權(quán)利要求3、4或5所述的基因與pEASY-E1連接獲得的重組表達(dá)載體。

10.權(quán)利要求1所述的蛋白及其編碼基因在制備磷酸果糖激酶中的應(yīng)用。