[發明專利]一種仙臺病毒抗原肽及其在仙臺病毒感染檢測中的應用

有效

• 申請號: 201310095105.5
• 申請日: 2013-03-22
• 公開（公告）號: CN103159833A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發明（設計）人: 向志光;楊志偉;佟巍;劉先菊;李雨函;魏強
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院醫學實驗動物研究所;北京華阜康生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C12N15/45;A61K39/155;A61P31/14;G01N33/68
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵;馮瓊

技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，尤其涉及一種仙臺病毒抗原肽及其在仙臺病毒感染檢測中的應用。

背景技術

仙臺病毒（Sandaivirus）屬于副粘病毒科副粘病毒亞科、呼吸道病毒屬病毒，為單股負鏈RNA病毒，是一種實驗嚙齒類常見和高發的感染性副流感病毒，是引起嚙齒類動物呼吸系統疾病的主要病原，小鼠、大鼠、倉鼠和豚鼠等嚙齒類實驗動物均易感。仙臺病毒多數情況下無明顯臨床表現，但會對實驗動物的免疫系統產生影響，在合并其他細菌性病原體的感染后造成致死性的影響，是嚙齒類實驗動物必須排查的病原體，其傳染性強，容易擴散，在多數情況下呈隱性感染，可影響幼鼠發育成長和降低成年鼠的繁殖率，改變體內細胞免疫反應，且很難從鼠群中清除。1953年在日本仙臺的一次新生兒肺炎流行中首次分離出，又名Hemagglutinating?virus?of?Japan(HVJ)，即Fushimi株。由于許多特性與流感不同，以后又陸續分離到其他毒株，故命名為副流感病毒。

仙臺病毒幾乎可凝集所有種類的紅血球，而且有溶血性。其表面具有血凝素和溶血素，溶血素有溶細胞作用，能溶解某些動物的紅細胞，與病毒的感染性有關，血凝素則能凝集某些哺乳類和禽類的紅細胞。仙臺病毒感染可侵犯呼吸道的表層組織，在上皮細胞中增殖，所致的免疫反應不牢固易再次感染，成人中通常引起輕型呼吸道感染，而5歲以下兒童發病率高、病情重，表現為急性阻塞性喉-支氣管-氣管炎和肺炎。由于仙臺病毒不僅感染動物，而且還會導致兒童患嚴重的呼吸道疾病，所以開發一種能夠及時的、準確的檢測仙臺病毒感染的產品，對動物和人類的健康具有重要意義。

目前的檢測多采用血清學的方法包括ELISA、IFA以及血凝抑制實驗等。這些血清學的檢測方法比較經典，在實際應用中卻存在一些問題，而最為主要的是血清學檢測使用的抗原質量的穩定性和適用性。在血清學檢測中最為關鍵的因素是抗原的質量。抗原的特異性和代表性，抗原的免疫原性和抗原性，這些因素均會影響到最終對血清學檢測結果的判定。近年來隨著多肽展示技術的應用，已經針對許多病原體的特異抗原表位進行了相關分析，也找到了一些有用的多肽表位，有些在微生物檢測中也得到了應用。使用的線性表位多肽庫，雖然不能包含天然空間構象表位，但是仍有許多線性表位具有良好的抗原性，多個抗原表位的組合可以很好的滿足血清學檢測的需要。

在目前的國家標準推薦的檢測方法中使用病毒全顆粒作為抗原物質來檢測實驗動物血清中可能存在的抗體。但是由于病毒全顆粒在實驗室的擴增培養以及分離純化等過程中存在著許多的變量，包括病原體本身的變異、每次生產病毒可能摻入的非特異性抗原成分等，這些因素均會影響到抗原的穩定性。雖然病毒全顆粒保證了全部抗原位點的存在，但是抗原暴露的不同方式也會影響到抗原表位的展示最后影響檢測工作的結果。而且病毒全顆粒抗原會和其他病原體的產生交叉抗原最終影響檢測的準確性。

發明內容

有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供一種仙臺病毒抗原肽及其在仙臺病毒感染檢測中的應用，本發明提供的仙臺病毒抗原肽提高了多肽組合的特異性和針對性，因此可提高實驗動物微生物檢測的準確性。

本發明提供了一種仙臺病毒抗原肽，具有如SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列。

本發明還提供了一種仙臺病毒抗原肽，具有如SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列中取代、缺失或添加一個或多個氨基酸殘基得到的氨基酸序列。

優選地，本發明提供的仙臺病毒抗原肽的氨基酸序列與SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列的同源性大于85%。

本發明提供的抗原肽是仙臺病毒的優勢抗原表位，且分子量較小，因此降低了與其他分子發生交叉反應的可能，提高了多肽組合的特異性和針對性，從而提高了對仙臺病毒感染檢測的準確率。

本發明提供了一種編碼SEQ?ID?NO:1所示氨基酸序列的DNA分子，具有如SEQ?ID?NO:2所示的核苷酸序列。

本發明還提供了一種仙臺病毒疫苗，包括本發明提供的仙臺病毒抗原肽及藥學上可接受的輔料。

本發明提供的仙臺病毒疫苗中抗原肽為具有如SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列或具有如SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列中取代、缺失或添加一個或多個氨基酸殘基得到的氨基酸序列。

優選地，本發明提供給的仙臺病毒疫苗的劑型為口服制劑或注射劑。

由于本發明提供的抗原肽是仙臺病毒的優勢抗原表位，所以在制備疫苗時，可減少仙臺病毒對動物的危害。

本發明提供的仙臺病毒抗原肽在仙臺病毒感染檢測中的應用。