[發(fā)明專利]中藥材金線蓮種苗選育及快繁培育方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310094591.9
• 申請日: 2013-03-22
• 公開（公告）號: CN103202227A
• 公開（公告）日: 2013-07-17
• 發(fā)明（設計）人: 賴新權
• 申請（專利權）人: 賴新權
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 東莞市中正知識產權事務所 44231
• 代理人: 張漢青

技術領域

本發(fā)明涉及植物的選育栽培技術，具體地說是一種中藥

材金線蓮種苗選育及快繁培育方法。

背景技術

現(xiàn)在生產的金線蓮至少有3個種，即花葉開唇蘭、臺灣金線蓮(A.formosanus?)?和高雄金線蓮(A.?koshunensis)。而金線蓮的品質主要由其有效成分含量決定，通過比較不同金線蓮藥用成分含量，選擇優(yōu)質材料單株，通過外植體克隆技術繁殖優(yōu)良單株；也可通過多倍體誘導、與當?shù)卦N類雜交、篩選繁殖等方法選育適宜栽培且有效成分含量高的新品系。

金線蓮種子不具備胚乳，無發(fā)芽能力，只能在真菌共生下，才能促進種子的萌發(fā)，但發(fā)芽率較低，以分根法或扦插法方式繁殖，則需時長且繁殖倍數(shù)不高。

發(fā)明內容

本發(fā)明目的是提供一種中藥材金線蓮種苗選育及快繁培育方法。

技術方案：中藥材金線蓮種苗選育及快繁培育方法，采集野生金線蓮植株，取其根部用無菌水沖洗干凈，切成0.5-1cm根段，用0.1%HgCl2表面消毒6-8min，然后用無菌水沖洗凈，再用75%的乙醇表面消毒3-5s，再用無菌水沖洗干凈，將洗凈的根段接種于PDA平皿中，在25℃恒溫培養(yǎng)，待從根段內長出真菌菌絲后，挑取尖端菌絲純化培養(yǎng)；以獲得純化菌根真菌粘帚霉屬AR-11或AR-13開唇蘭小菇作為金線蓮共生真菌，實現(xiàn)工業(yè)化生產金線蓮共生苗。

選擇MS培養(yǎng)基作為金線蓮的接種培養(yǎng)基，在MS培養(yǎng)基中還添加6-BA細胞分裂素和NAA植物生長調節(jié)劑，來促進金線蓮叢生芽的快速生長；

金線蓮種植地選擇在海拔高度較高的林地溪溝邊蔭涼處，要求海拔400m以上，近闊葉林或針闊葉林交混地帶，要求1月份平均氣溫≤10℃，7月份平均氣溫≤25℃，空氣相對濕度≥70％。

有益效果：金線蓮種子不具備胚乳，無發(fā)芽能力，在野生條件下，一般是在真菌共生下，才能促進種子的萌發(fā)，從而得以生長。離體快繁體系，采用人工種子離體萌發(fā)繁殖種苗，解決種苗生產過程中芽的增殖率較低、生長周期長、生根壯苗不均勻等方面仍存在的問題，提高種苗適栽能力。通過外植體克隆技術，擴大繁殖優(yōu)良單株，提供優(yōu)良品種種苗。

本發(fā)明從野生金線蓮菌根分離得到的共生真菌與金線蓮組培幼苗建立共生關系獲得共生苗，提高金線蓮組培苗的抗病能力及成活率．最終達到工業(yè)化生產金線蓮共生苗的目的。本發(fā)明通過觀察前期培育獲得的金線蓮共生苗的菌根結構，以確認其共生關系的建立及研究其共生機制，為進一步擴大栽培、工廠化生產金線蓮共生苗提供依據(jù)。

選擇通過叢生芽誘導增殖技術，使金線蓮組織培養(yǎng)過程中直接誘導產生叢生芽，從而加快其繁殖速度，實現(xiàn)金線蓮的工廠化育苗和大規(guī)模生產。

具體實施方式

中藥材金線蓮種苗選育及快繁培育方法，采集野生金線蓮植株，取其根部用無菌水沖洗干凈，切成0.5-1cm根段，用0.1%HgCl2表面消毒6-8min，然后用無菌水沖洗凈，再用75%的乙醇表面消毒3-5s，再用無菌水沖洗干凈，將洗凈的根段接種于PDA平皿中，在25℃恒溫培養(yǎng)，待從根段內長出真菌菌絲后，挑取尖端菌絲純化培養(yǎng)；以獲得純化菌根真菌粘帚霉屬AR-11或AR-13開唇蘭小菇作為金線蓮共生真菌，實現(xiàn)工業(yè)化生產金線蓮共生苗。

選擇MS培養(yǎng)基作為金線蓮的接種培養(yǎng)基，在MS培養(yǎng)基中還添加6-BA細胞分裂素和NAA植物生長調節(jié)劑，來促進金線蓮叢生芽的快速生長；

金線蓮種植地選擇在海拔高度較高的林地溪溝邊蔭涼處，要求海拔400m以上，近闊葉林或針闊葉林交混地帶，要求1月份平均氣溫≤10℃，7月份平均氣溫≤25℃，空氣相對濕度≥70％。

具體詳細說明如下。

一、對外植體組織培養(yǎng)部位的選擇。

本發(fā)明在研究過程中分別對金線蓮無菌苗的頂芽、中部和基部作為組織培養(yǎng)部位，分別在MS培養(yǎng)基和B5培養(yǎng)基上進行培育。（誘導率=誘導芽數(shù)/接種數(shù)）。

MS培養(yǎng)基上無菌苗各部位的誘導率如下表。

?B5培養(yǎng)基上無菌苗各部位的誘導率如下表。