[發明專利]一種長柄扁桃外植體不定芽誘導方法

有效

• 申請號: 201310094273.2
• 申請日: 2013-03-22
• 公開（公告）號: CN103314846A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 郭斌;陳邦;尉亞輝;申燁華;李聰;尹久盛;陳閩
• 申請（專利權）人: 西北大學;波音（中國）投資有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 西安西達專利代理有限責任公司 61202
• 代理人: 謝鋼

技術領域

本發明涉及一種長柄扁桃外植體不定芽誘導方法，屬于植物組織培養技術領域。

背景技術

長柄扁桃（Amygdalus?pedunculata?Pall.）是薔薇科（Rosaceae）桃屬（Amygdalus）扁桃亞屬（Amygdalus）的落葉灌木，又名野櫻桃、柄扁桃、毛櫻桃，是我國特有的扁桃屬野生種。長柄扁桃具有適應范圍廣、抗旱、耐瘠薄、抗風蝕、固沙能力強等優良特性，在干旱沙漠地區栽培既有生態效益又有一定的經濟效益。長柄扁桃果仁含粗脂肪531g/kg,?粗蛋白255.9g/kg,?鐵39.88mg/kg,?鋅42.16mg/kg,?鈣0.224mg/kg,?營養價值高。果實中含致瀉成分郁李仁甙（Amygdaluside,?3-rhamnoglucosylkaempferol），可廣泛用于醫療、保健方面，對氣管炎、高血壓、神經衰弱、肺炎、糖尿病都有一定療效，也可用來輔助治療癌癥；長柄扁桃仁還可制成鎮靜劑和止痛劑；適于加工保健品，其含油量高達45.19%～52.00%，可作工業原料，是一種極具開發潛力的生物能源植物。但是由于自然和人為地破壞，長柄扁桃的分布面積日趨減少，已被列為二級瀕危植物。生產上亟需發展長柄扁桃組織快繁技術，而目前此項技術還處于探索階段。

目前長柄扁桃的繁殖方式還是以播種、扦插為主。實生繁殖周期長，技術難度不大，但由于長柄扁桃為異花授粉，實生苗個體間差異大，難以保持優良的經濟形狀。而長期的扦插繁殖容易造成真菌和病毒的累積，導致品種退化，完善的組織培養技術可以成為長柄扁桃新品種培育及生理生化機制研究的重要手段。長柄扁桃組織培養不僅可以快速繁殖長柄扁桃優良種苗，用于大面積人工栽培生產，滿足市場需求，還為下一步篩選優良無性系建立良好的基礎。

發明內容

本發明的目的在于提供一種利用鉀離子提高長柄扁桃外植體上不定芽誘導數量的方法。

為了實現上述目的，本發明采取如下的技術解決方案：

一種長柄扁桃外植體不定芽誘導方法，包括長柄扁桃種子苗的培養和長柄扁桃不定芽的誘導，在長柄扁桃不定芽誘導培養基中添加可溶性鉀鹽誘導不定芽的形成。

上述不定芽誘導培養基為MS基本培養基中添加可溶性鉀鹽、6-芐氨基腺嘌呤和萘乙酸，其中鉀離子濃度為1000～1600mg/L，6-芐氨基腺嘌呤濃度為2.5～15μM，萘乙酸濃度為0～5μM。優選的條件是：鉀離子濃度為1000～1400mg/L，6-芐氨基腺嘌呤濃度為5～10μM，萘乙酸濃度為0.5～2.5μM。所述可溶性鉀鹽選自硝酸鉀、氯化鉀、磷酸二氫鉀。

本發明選取長柄扁桃[Amygdalus?pedunculata?Pall.]?種子為最初材料，在無菌條件下進行萌發生成種子苗，以種子苗的節（腋芽）為不定芽誘導的外植體，通過提高培養基的鉀離子用量，可顯著提高長柄扁桃不定芽的誘導數量，而且不會增加不定芽的褐化程度。其操作簡單，很容易提高長柄扁桃離體不定芽的誘導效率，為人工大規模進行長柄扁桃的快速繁殖提供重要的技術基礎。

附圖說明

圖1為在MS基本培養基中添加5.0μM?的6-BA，5.0μM的NAA；

圖2為在MS基本培養基中添加2200mg/L?K⁺（以6.04g/L?KNO₃的形式加入）、5μM?的6-BA，2.0μM的NAA；

圖3為在MS基本培養基中添加10μM?的6-BA，2.5μM的NAA；

圖4?為在MS基本培養基中添加1200mg/L?K⁺（以3.29g/L?KNO₃的形式加入）、10μM?的6-BA，2.5μM的NAA；

圖5?為在MS基本培養基中添加1200mg/L?K⁺（以0.29g/L?KCl的形式加入）、10μM?的6-BA，2.5μM的NAA；

圖6為在MS基本培養基中添加2200mg/L?K⁺（以7.68g/L?KH₂PO₄的形式加入）、10μM?的6-BA，2.5μM的NAA。

具體實施方式

具體地說，本發明利用鉀離子提高長柄扁桃外植體上不定芽誘導數量的方法包括下列步驟：?

（1）長柄扁桃種子苗的培養采用常規無菌苗培養