[發(fā)明專利]大熊貓孕酮濃度值的快速檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310092282.8
• 申請日: 2013-03-21
• 公開（公告）號: CN103207279A
• 公開（公告）日: 2013-07-17
• 發(fā)明（設計）人: 羅娌;侯蓉;張志和;黃河;王成東;黃祥明;蘭景超
• 申請（專利權）人: 成都大熊貓繁育研究基地
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種大熊貓孕酮濃度值的快速檢測方法，包括以下步驟：

（1）對雌性大熊貓進行尿樣收集，在尿樣上標記后進行冷凍或冷藏保存；

（2）用孕激素抗體CL425將96孔酶標板包被6～48小時；

（3）將孕酮標準品和尿樣稀釋后，分別按順序依次加入到已經包被好的96孔酶標板孔中；在96孔酶標板孔中加入Horseradish?peroxidase溶液，在37℃下孵育0.5小時后，用洗液洗滌96孔酶標板；

（4）將H₂O₂和ABTS加入到檸檬酸底液中，混合均勻成顯色溶液；

（5）往洗滌后的96孔酶標板孔中加入已配制好的顯色溶液,室溫下孵育30～60分鐘后用酶標儀讀取光吸收值，所得數(shù)值為該大熊貓孕酮值；

（6）將尿樣和肌酐標準品稀稀釋后分別按順序依次加入到96孔酶標板中，再在96孔酶標板孔中加入NaOH和苦味酸，在室溫下孵育10～20分鐘后，用酶標儀檢測光密度值，所得數(shù)值為該大熊貓尿樣肌酐值；

（7）用測到的該大熊貓孕酮值除以該大熊貓肌酐值，所得結果為該大熊貓孕酮濃度值。

2.根據(jù)權利要求2所述的一種大熊貓孕酮濃度值的快速檢測方法，其每一次大熊貓尿樣收集包括以下步驟：

（1）清潔并拖干獸舍地面；

（2）將需收集尿樣的大熊貓放入獸舍，工作人員守候，一旦大熊貓排出小便，立即將大熊貓放到其它獸舍；

（3）用清潔注射器采集地面新鮮尿樣，裝入冷凍管，做好標記，然后立即放入冰箱冷凍或冷藏。