[發明專利]LOLP-1蛋白和用于癌癥的診斷等的試劑盒

在審

• 申請號: 201310090071.0
• 申請日: 2013-03-20
• 公開（公告）號: CN104059140A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發明（設計）人: 祝躍球
• 申請（專利權）人: 湖南萊拓福生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N15/12;C12Q1/68;G01N33/68
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 閆桑田

技術領域

本文涉及醫藥生物技術領域，具體地說，涉及了一種人類腫瘤特異性抗原萊拓福蛋白-1(Light of life protein-1，LOLP-1蛋白)，以及一種用于癌癥的早期診斷、診斷、治療指導、預后判斷或復發監測的試劑盒。

背景技術

乳腺癌、肺癌、腸癌、甲狀腺癌和肝癌等癌癥均是目前多發和常見的癌癥，并且致死率非常高。目前尚缺乏有效地針對乳腺癌、肺癌、腸癌、甲狀腺癌和肝癌患者的早期診斷、診斷、治療指導、預后判斷或復發監測的方法。因此，急需新的特異性高、敏感性高、易操作的、對人體無危害、能在癌癥發病的早期及時診斷、并且對于治療指導、預后判斷或復發檢測等具有實用價值的靶標和檢測評估方法。

發明內容

針對上述問題，本發明人從人類原發性腫瘤組織中分離鑒定出一個新的特異性蛋白，即人類腫瘤特異性抗原萊拓福蛋白-1(Light of life protein-1，LOLP-1蛋白)。該蛋白質由316個氨基酸組成，在除消化道外的正常成體組織中幾乎不表達。但經本發明人的研究發現LOLP-1蛋白在人類肝癌、肺癌、乳腺癌及甲狀腺癌中過度表達。相反，LOLP-1蛋白在人的正常消化道組織中高表達，但是在腸癌組織中低表達或不表達。

本發明人進一步進行了深入地研究，獲得了一種新的蛋白質以及編碼該蛋白質的核苷酸序列，并利用該蛋白質或其核苷酸序列的特異性，開發用于癌癥的早期診斷、診斷、治療指導、預后判斷或復發監測的試劑盒，

具體而言，本文涉及如下內容：

1.一種人類腫瘤特異性抗原萊拓福蛋白-1(LOLP-1蛋白)，其由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列構成。

2.編碼LOLP-1蛋白的DNA，其由SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或 其互補序列構成。

3.一種重組載體，其包括項2的重組載體。

4.一種轉化體，其是將項3所述的重組載體導入宿主細胞而得到的轉化體。

5.一種用于癌癥的早期診斷、診斷、治療指導、預后判斷或復發監測的試劑盒，其包含特異性檢測LOLP-1蛋白的試劑。

6.項5所述的試劑盒，其中，所述特異性檢測LOLP-1蛋白的試劑是特異性識別LOLP-1蛋白的抗體。

7.項6所述的試劑盒，其中所述LOLP-1蛋白由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列構成。

8.項5-7中任一項所述的試劑盒，其中所述試劑可用于檢測血清、尿液、乳汁和腸液等體液，大便或組織樣本。

9.項5所述的試劑盒，其中，所述特異性檢測LOLP-1蛋白的試劑是特異性識別LOLP-1蛋白核酸的引物或探針。

10.項9所述的試劑盒，其中，所述LOLP-1蛋白核酸由SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或其互補序列構成。

11.項5-10中任一項所述的試劑盒，其中所述試劑盒還包含LOLP-1蛋白或核酸標準品。

12.項5-11中任一項所述的試劑盒，其中所述癌癥選自下組：肝癌、肺癌、腸癌、甲狀腺癌和乳腺癌。

13.項5-8中任一項所述的試劑盒，其中所述試劑盒是酶聯免疫法吸附測定(ELISA)試劑盒、時間分辨熒光免疫測定(TRFIA)試劑盒、化學發光檢測試劑盒。

14.項13所述的試劑盒，其包括：

包被有LOLP-1蛋白的特異性捕獲抗體的ELISA板；

生物素標記的另一種屬來源的LOLP-1蛋白的特異性檢測抗體；該捕獲抗體與檢測抗體均可與LOLP-1蛋白結合。

15.項14所述的試劑盒，其還包括：

包被緩沖液(1×PBS，pH7.3±0.1)；

樣品稀釋液(1×PBS、1%BSA、0.05%NaN₃，pH7.3±0.1)；

封閉液(1×PBS、3%BSA)；

洗脫液PBST(1×PBS、0.05%Tween-20)；

Streptavidin-HRP或者Streptavidin-Eu。

16.根據項14或15的試劑盒，其中捕獲抗體和檢測抗體是利用LOLP-1蛋白免疫動物獲得的純化抗體或單克隆抗體。

17.根據項14-16中任一項的試劑盒，其中檢測抗體的生物素標記效率(生物素/抗體)為5-10。