[發明專利]一種測定三聚氰胺的方法

有效

• 申請號: 201310087869.X
• 申請日: 2013-03-19
• 公開（公告）號: CN103175818A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發明（設計）人: 唐寧莉;李欣;蒙華毅
• 申請（專利權）人: 桂林理工大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種測定三聚氰胺的方法，特別是能量轉移熒光光譜法測定三聚氰胺的方法。

背景技術

三聚氰胺是一種重要的三嗪類含氮雜環有機化合物，常用作化工原料，不可用于食品加工或食品添加物。中國自2008年三鹿奶粉事件發生后，國家規定：液態奶（包括原料乳）、奶粉、其他配方乳粉中三聚氰胺的限量值為2.5mg/kg，高于2.5mg/kg的產品一律不得銷售。因此研究建立一種快速、準確、成本低廉的測定牛奶中三聚氰胺含量的新方法具有重要的意義。目前，三聚氰胺的測定方法主要是高效液相色譜法、氣相色譜-質譜聯用法、液相色譜-質譜聯用法等。但是這些方法所用儀器昂貴，不易推廣。熒光光譜法具有分析速度快、操作簡便、分析精度高等優點，在實際分析中應用廣泛。曙紅Y-中性紅作為能量轉移體系，已應用于蛋白質的測定，但利用該能量轉移體系采用熒光光譜法測定三聚氰胺，尚未見報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種基于曙紅Y-中性紅能量轉移的測定三聚氰胺的熒光光譜法。

具體步驟為：

????（1）于6支10mL比色管中依次加入0.0、0.07、1.0、2.0、3.0、5.0?mL?0.1～0.5g/L的三聚氰胺溶液，再在每支比色管中分別加入1.0～2.5?mL?4.0×10^-6mol/L的曙紅Y(EY)溶液、0.5～1.0mL?2.0×10^-4mol/L的中性紅(NR)溶液和0.3～1.0mL?pH3.5的伯瑞坦-羅比森（Britton-Robinson，B-R）緩沖溶液，以不加三聚氰胺的溶液為試劑空白，然后用超純水將6支比色管定容至刻度，搖勻，在30℃的恒溫水浴中反應30?min后，于熒光光度計上，用1cm石英比色皿，以520nm為激發波長，在538nm處分別測定含三聚氰胺溶液的熒光值F_538nm和試劑空白的熒光值F₀，計算熒光值差值ΔF_538nm?=?F_538nm–F₀值,?其熒光值差值ΔF_538nm與三聚氰胺質量濃度ρ在1.4～100mg/L范圍內成線性關系，線性回歸方程為：ΔF_538nm=0.7736ρ+?17.33，相關系數r=0.9992，檢出限為1.1mg/L。

（2）取牛奶30?mL，加入20.0?mL?質量百分比濃度為1%的三氯乙酸溶液和8.0?mL質量百分比濃度為2%的乙酸鉛溶液，超聲20?min。然后取部分溶液于離心管中，離心10?min，取上清液作為待測液。

（3）取步驟（2）處理后的牛奶待測液1mL，依步驟（1）的方法測定熒光值，計算出牛奶中三聚氰胺的含量。

本發明方法簡便、快捷。

附圖說明

圖1為本發明實施例空白與20?mg/L三聚氰胺(MEL)的熒光光譜圖。

圖中標記a：試劑空白；b：4.0×10^-6?mol/L?EY?-?2.0×10^-4?mol/L?NR?-?pH3.5?B-R?-?20?mg/L?MEL。

具體實施方式

實施例：