[發(fā)明專利]黃瓜乙烯信號轉導途徑CTR1基因及其編碼的蛋白

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310086923.9
• 申請日: 2013-03-18
• 公開（公告）號: CN103173463A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發(fā)明（設計）人: 別蓓蓓;蔡潤;潘俊松;何歡樂
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/84;A01H5/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 楊元焱

技術領域

本發(fā)明涉及基因工程，特別涉及一種黃瓜乙烯信號轉導途徑CTR1基因及其編碼的蛋白。

背景技術

黃瓜(Cucumis?sativus?L.)是葫蘆科(Cucurbitaceae)甜瓜屬(cucumis)一年蔓生的草本植物。特別是黃瓜花性型分化多樣，常見的黃瓜品種是雌雄花獨立著生的異花同株型(monoecious)；不過某些品種也會出現(xiàn)兩性花(hermaphrodite)，在大量的生理學和遺傳學的基礎上，黃瓜已逐漸成為研究植物性型分化的模式材料。

乙烯作為一種植物激素對植物的正常發(fā)育和脅迫反應起著很重要的作用。在正常發(fā)育過程中，乙烯調控種子萌發(fā)種苗生長、葉片和花的脫落、果實成熟、器官衰老、花性別決定等生理過程。此外，當植物受到外界刺激包括傷害、病原侵入、干旱等，乙烯的生物合成增加，促進防衛(wèi)化合物的生成，表明乙烯在應對生物和非生物脅迫中起著重要作用。

在乙烯生物合成途徑上，已做了大量的研究。而黃瓜乙烯信號轉導途徑研究較為緩慢，途徑中一些重要的組分還未得到分離和鑒定。

CTR1基因是一個乙烯信號轉導途徑中的負調控基因，也是第一個被克隆的乙烯信號轉導途徑基因[Kieber?JJ?et?al.CTR1，a?negative?regulator?of?the?ethylene?response?pathway?in?Arabidopsis，encodes?a?member?of?the?Raf?family?of?protein?kinases.Cell，1993，72(3)：427-441.]。遺傳和生化研究發(fā)現(xiàn)，無跨膜功能域或膜附著結構的CTR1的氨基端可與內質網(wǎng)上的乙烯受體羧基端相互作用，從而間接結合到內質網(wǎng)上形成ETR1/CTR1復合體進而負調控乙烯反應[Gao?Z?et?al.Localization?of?the?Raf-like?kinase?CTR1to?the?endoplasmic?reticulum?of?Arabidopsis?through?participation?in?ethylene?receptor?signaling?complexes.The?Journal?of?Biological?Chemistry，2003，278：34725-34732.]目前，CTR1基因作為乙烯信號轉導途徑中的關鍵組分，已從擬南芥、西葫蘆、甜瓜、番茄、小麥、飛燕草、月季、獼猴桃等物種中分離。因此，分離和鑒定黃瓜CTR1基因為研究CTR1的轉錄和表達提供了可能，同時也為功能性研究CTR1在乙烯調控黃瓜生長發(fā)育過程中的作用奠定了基礎。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的，是為了進一步研究黃瓜乙烯信號轉導途徑相關基因的功能及應用，以及乙烯信號轉導途徑基因與黃瓜性型之間的相關性，提供一種黃瓜乙烯信號轉導途徑CTR1基因及其編碼的蛋白。

本發(fā)明所采取的技術方案如下：

一種黃瓜乙烯信號轉導途徑CTR1基因，命名為CsCTR1，其DNA序列如SEQID?NO.1所示。

黃瓜乙烯信號轉導途徑CTR1基因編碼的蛋白，其氨基酸殘基序列如SEQID?NO.2所示。

上述黃瓜乙烯信號轉導途徑CTR1基因，其中，所述CsCTR1含有一個2559bp的開放閱讀框，該開放閱讀框為第1位至第2559位核苷酸。

上述黃瓜乙烯信號轉導途徑CTR1基因，其中，所述的開放閱讀框的起始密碼子為ATG，終止密碼子為TGA。

上述黃瓜乙烯信號轉導途徑CTR1基因編碼的蛋白，其中，將SEQID?NO.2所示的氨基酸殘基序列經過一個以上氨基酸殘基的取代和/或缺失或添加，得到具有與所述蛋白相同活性的衍生蛋白。

上述黃瓜乙烯信號轉導途徑CTR1基因，其中，該基因的全長由以下引物對擴增得到：

一條引物的核苷酸序列如SEQID?NO.3所示，另一條引物的核苷酸序列如SEQID?NO.4所示。

含有上述基因的重組載體，是將所述基因插入表達載體pBI121CaMV35S啟動子和終止子nos之間獲得。

含有上述基因的擬南芥轉化純株系。