[發(fā)明專利]溫敏型膠原蛋白多肽聚合物及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310086840.X
• 申請(qǐng)日: 2013-03-19
• 公開（公告）號(hào): CN103408753A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張阿方;孫豪;喬瀟;李娟;陶雄;李文;張修強(qiáng);許安球
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海大學(xué)
• 主分類號(hào): C08G69/40
• 分類號(hào): C08G69/40
• 代理公司: 上海上大專利事務(wù)所(普通合伙) 31205
• 代理人: 陸聰明

1.一類溫敏型膠原蛋白多肽聚合物，其特征在于該多肽聚合物的結(jié)構(gòu)式為

n=100~200。

2.一種制備根據(jù)權(quán)利要求1所述的溫敏型膠原蛋白多肽聚合物的方法，其特征在于該方法的具體步驟為：

a.?將羥脯氨酸和N,N-二異丙基乙胺DiEA溶于水中,?在惰性氣氛和冰鹽浴下，緩慢滴加脯氨酸活性酯的N，N-二甲基甲酰胺DMF溶液；在室溫下攪拌至反應(yīng)完全；經(jīng)分離提純得無色油狀的化合物A；其中羥脯氨酸、N,N-二異丙基乙胺DiEA、脯氨酸活性酯的摩爾比為：1:（1.2~1.5）:（1.1~1.2）；所述化合物A的結(jié)構(gòu)式為：

；

b.?將步驟a所得化合物A溶于干燥DMF中，然后在冰浴和惰性氣氛下，加入NaH，室溫下逐滴滴加核心為芐氯的一代烷氧醚樹枝化基元的DMF溶液；滴加完畢后再將反應(yīng)液在室溫下攪拌反應(yīng)20～30小時(shí)，而后滴加甲醇終止反應(yīng)；去除溶劑，殘留物溶于二氯甲烷DCM中，經(jīng)10wt%KHSO₄水溶液和飽和食鹽水洗滌，經(jīng)分離純化得化合物B；其中化合物A、NaH（氫化鈉）和核心為芐氯的一代烷氧醚樹枝化基元的摩爾比為：1:（5~6）:（1.1~1.2）；所述的核心為芐氯的一代烷氧醚樹枝化基元的結(jié)構(gòu)式為：?????????????

所述的化合物B的結(jié)構(gòu)式為：

c.將五氯酚和步驟b所得化合物B按(1.2~1.5)：1的摩爾比溶于干燥的DCM中，在冰鹽浴和惰性氣體保護(hù)下，加入1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳化二亞胺鹽酸鹽EDC·HCl?，室溫下繼續(xù)攪拌至反應(yīng)完全；反應(yīng)液先后用飽和NaHCO₃和食鹽水洗滌，經(jīng)分離提純后得到二肽活性酯；在冰鹽浴和惰性氣氛下，將該二肽活性酯用DCM溶解后滴加到溶有甘氨酸甲酯鹽酸鹽和N,N-二異丙基乙胺DiEA?的DCM溶液中，滴加完畢后再將反應(yīng)液在室溫下攪拌反應(yīng)3～5小時(shí)，經(jīng)分離提純后得到化合物C；其中所述的EDC·HCl與化合物B的摩爾比為1:（1.2~1.5）；所述的二肽活性酯、甘氨酸甲酯鹽酸鹽和N,N-二異丙基乙胺DiEA的摩爾比為：1:（1.1~1.2）：（1.2~1.5）；化合物C的結(jié)構(gòu)式為：?

d.將步驟c所得化合物C溶于MeOH和H₂O按3:1的體積比配成的混合溶劑中，冰水浴下加入一水氫氧化鋰，攪拌1.5?~3.0小時(shí)后升至室溫，再反應(yīng)3.5~5小時(shí)，去除溶劑，殘留物溶于DCM后，調(diào)節(jié)pH至5~6，用飽和食鹽水洗滌，經(jīng)分離提純后得到的三肽羧酸；其中化合物C與一水氫氧化鋰的摩爾比為：1:（2~3）；三肽羧酸的結(jié)構(gòu)式為：?

；

d.再將步驟c所得三肽羧酸與五氯酚按1:（1.2~1.5）?的摩爾比溶于干燥DCM中，冰鹽浴惰性氣體保護(hù)下，加入EDC·HCl，室溫下繼續(xù)攪拌至反應(yīng)完全，去除溶劑，殘留物溶于DCM后，調(diào)節(jié)pH至5~6，用飽和食鹽水洗滌，分離提純后得到化合物D；其中三肽羧酸與EDC·HCl的摩爾比為：1:（1.2~1.5）；其中，化合物D的結(jié)構(gòu)式為：

?

e.將步驟d所得化合物D溶于H₂O中，在5?^oC下緩慢滴加HCl的水溶液，攪拌至反應(yīng)完全，去除溶劑即得大單體E；其中化合物D與HCl的摩爾比為：1:（50~60）；大單體E的結(jié)構(gòu)式為：

f.將步驟e所得大單體E溶于二甲亞砜DMSO中，大單體E溶于二甲亞砜的質(zhì)量體積比為：配制成濃度為0.1g：0.10~0.15mL，加入N,N-二異丙基乙胺DiEA，在惰性氣氛下攪拌3~5天，其中大單體E與N,N-二異丙基乙胺DiEA的摩爾比為：1:（3~5）；用乙醚沉析出后再經(jīng)分離純化得到目標(biāo)聚合物，即溫敏型膠原蛋白多肽聚合物。