[發(fā)明專利]一株綠色木霉及培養(yǎng)方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310086521.9
• 申請(qǐng)日: 2013-03-18
• 公開（公告）號(hào): CN103131642A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙欽剛;孫中濤
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 濟(jì)南巨微生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;A01N63/04;A01P3/00;C05F11/08;C12R1/885
• 代理公司: 濟(jì)南金迪知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37219
• 代理人: 王緒銀

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株綠色木霉及其培養(yǎng)方法與應(yīng)用，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

木霉菌屬于半知菌亞門、絲孢綱、絲孢目，粘孢菌類，是一類普遍存在的真菌。綠色木霉（Trichoderma?viride）在自然界分布廣泛，常腐生于木材、種子及植物殘?bào)w上。綠色木霉能產(chǎn)生多種具有生物活性的酶系，如：纖維素酶、幾丁質(zhì)酶、木聚糖酶等，在植物病理生物防治中具有重要的作用。綠色木霉是產(chǎn)纖維素酶活性最高的菌株之一，所產(chǎn)生的纖維素酶對(duì)作物有降解作用，綠色木霉又是一種資源豐富的拮抗微生物，在植物病理生物防治中具有重要的作用，具有保護(hù)和治療雙重功效，可有效防治土傳性病害。

中國專利文獻(xiàn)CN102839131A（申請(qǐng)?zhí)?01210323738.2）公開了一株綠色木霉菌及其應(yīng)用。該綠色木霉（Trichoderma?viride）H06在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的登記入冊(cè)編號(hào)為CGMCC?No.6229，它對(duì)由尖孢鐮刀菌古巴專化型4號(hào)小種（FOC4）引起的香蕉枯萎病的防治效果可達(dá)88%，其培養(yǎng)條件簡單、容易保存，易于工業(yè)化生產(chǎn)，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。

中國專利文獻(xiàn)CN102168019A（申請(qǐng)?zhí)?01010589866.2）公開了一種綠色木霉菌株及其代謝物的應(yīng)用,屬于微生物和農(nóng)業(yè)領(lǐng)域。該綠色木霉菌株能有效拮抗黃曲霉生長,其名稱為綠色木霉GZ101,于2010年11月4日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏號(hào)為CCTCC?NO:M2010291。該綠色木霉菌株在PDA液體培養(yǎng)基中的發(fā)酵上清液噴灑于花生種植土壤中,能有效地降低花生收獲前黃曲霉毒素污染,降低率達(dá)97%,因此可應(yīng)用該綠色木霉菌株的代謝物制備成降低花生收獲前黃曲霉毒素污染的制劑。

中國專利文獻(xiàn)CN101638328A（申請(qǐng)?zhí)?00810224245.7）公開了秸稈有機(jī)肥料及其制備方法。該降解秸稈制備肥料的方法是用降解秸稈的菌劑發(fā)酵秸稈得到肥料；所述降解秸稈的菌劑的活性成份包括綠色木霉(Trichoderma?viride)、黃綠木霉(Trichoderma?aureoviride)和飼料類芽孢桿菌(Paenibacillus?pabuli)。所述降解秸稈的菌劑中,所述綠色木霉(Trichoderma?viride)、所述黃綠木霉(Trichoderma?aureoviride)和所述飼料類芽孢桿菌(Paenibacillus?pabuli)的集落形成單位數(shù)目比為(0.8-1.2)∶(0.8-1.2)∶(0.8-1.2)。本發(fā)明的降解秸稈的肥料用作基肥,可顯著改善蔬菜的品質(zhì)。

因此研究綠色木霉新菌種對(duì)于開發(fā)新的微生物肥料具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一株綠色木霉及培養(yǎng)方法與應(yīng)用。

本發(fā)明技術(shù)方案如下：

一株綠色木霉（Trichoderma?viride）JUWEI002已在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏號(hào)為CGMCC?NO.7035，保藏時(shí)間為2012年12月24日，保藏地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國科學(xué)院微生物研究所。

綠色木霉（Trichoderma?viride）JUWEI002的菌落生長迅速，呈致密叢束狀，其表面的顏色呈綠色。菌絲有隔分枝，無厚垣孢子。分生孢子梗是菌絲的短側(cè)枝，側(cè)枝上對(duì)稱分枝，形成二級(jí)分枝，分枝角度近于直角，在分枝末端形成瓶狀小梗。分生孢子卵圓形，綠色，簇生于小梗頂端。

上述綠色木霉（Trichoderma?viride）JUWEI002的培養(yǎng)方法，步驟如下：

①用的綠色木霉（Trichoderma?viride）JUWEI002接種于平板PDA培養(yǎng)基，在溫度25℃～30℃條件下，培養(yǎng)72h；

②挑取菌落邊緣菌絲轉(zhuǎn)接于麩皮汁培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度25℃～30℃，200rpm，培養(yǎng)時(shí)間24～36h，制得綠色木霉培養(yǎng)液；

③以1～5%（w/w）的接種量將步驟②制得的綠色木霉JUWEI培養(yǎng)液接種于麩皮汁發(fā)酵培養(yǎng)基中，發(fā)酵條件為：溫度28～30℃，罐壓：0.05Mpa，通風(fēng)0.8～1vvm，攪拌速度180～200rpm，培養(yǎng)時(shí)間為2～3天，即得。

根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟①中的平板PDA培養(yǎng)基，每升組分如下：馬鈴薯200g，蔗糖20g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL；

根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟②中的麩皮汁培養(yǎng)基組分如下，均為重量百分比：麩皮10%，蔗糖3-5%，自然pH值；