[發(fā)明專利]一種煙草中苦參堿殘留量的高效液相色譜檢測(cè)方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310086150.4
• 申請(qǐng)日: 2013-03-18
• 公開（公告）號(hào): CN103163264A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李義強(qiáng);王秀國;王鳳龍;孔凡玉;孫惠青;徐金麗;徐光軍;鄭曉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 青島聯(lián)智專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 37101
• 代理人: 崔濱生

1.一種煙草中苦參堿殘留量的高效液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：稱取一定質(zhì)量苦參堿標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解定容，制成苦參堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，將苦參堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋，配制成系列濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液；

（2）提取：稱取煙葉樣品置于錐形瓶中，加入煙草樣品的3~15倍二氯甲烷，經(jīng)振蕩后過濾，濃縮近干；

（3）凈化：濃縮瓶中殘留物用二氯甲烷溶解，轉(zhuǎn)入二氯甲烷預(yù)淋洗的氧化鋁固相小柱中，二氯甲烷淋洗，二氯甲烷-甲醇混合溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮，定容；

（4）檢測(cè)：待儀器穩(wěn)定后，用步驟（1）配制的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)樣，保留時(shí)間定性，液相色譜檢測(cè)，在此基礎(chǔ)上，對(duì)步驟（3）收集的凈化樣品進(jìn)行液相色譜檢測(cè)；?

（5）標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

（6）結(jié)果分析：按以下公式計(jì)算試樣中苦參堿的含量

R=

R—樣品中苦參堿殘留量，單位mg/kg；

C₁—標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，單位mg/L；

V₁—標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣體積，單位μL；

V₂—樣品溶液最終定容體積，單位mL；

V₃—樣品溶液進(jìn)樣體積，單位μL；

S₁—標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰高，AU；

S₂—樣品溶液的峰高，AU；

W—樣品稱取質(zhì)量，單位g。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述煙草中苦參堿殘留量的高效液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟（1）中的苦參堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，是指稱取0.0100?g苦參堿標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解定容至100?mL，制成100?mg/L儲(chǔ)備液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述煙草中苦參堿殘留量的高效液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟（1）中的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液是指0.5、1.0、2.0、5.0、10、0、20.0?mg/L的苦參堿標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述煙草中苦參堿殘留量的高效液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟（2）中的煙葉樣品，是指鮮煙葉、干煙葉中的一種。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述煙草中苦參堿殘留量的高效液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟（2）中的樣品置于錐形瓶，是指4~20?g樣品置于250?mL?錐形瓶。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述煙草中苦參堿殘留量的高效液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟（2）和（3）中的濃縮，是指用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取樣品在40℃~50℃的范圍內(nèi)濃縮近干。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述煙草中苦參堿殘留量的高效液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟（3）中二氯甲烷-甲醇混合溶液，是指二氯甲烷和甲醇體積比為9:1的混合溶液。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述煙草中苦參堿殘留量的高效液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟（4）中的液相色譜檢測(cè)采用高效液相色譜儀-紫外檢測(cè)器，Waters?Alliance?2695/2487，色譜柱：Waters?Sun?Fire，C18柱，5.0?μm，4.6×150?mm；檢測(cè)條件：

流動(dòng)相：乙腈/質(zhì)量濃度0.05%三乙胺水溶液，體積比55:45；

流速：0.8?mL/min；

測(cè)定波長(zhǎng)：219?nm；

柱溫：30℃；

進(jìn)樣量：10?μL。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述煙草中苦參堿殘留量的高效液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟（5）中的進(jìn)樣濃度，是指0.5、1.0、2.0、5.0、10、0、20.0?mg/L。