[發明專利]一種山藥苗離體繁殖方法

無效

• 申請號: 201310085946.8
• 申請日: 2013-03-18
• 公開（公告）號: CN103125396A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 吳金平;丁自立;鄧曉輝;矯振彪;陳磊夫;郭鳳領;邱正明
• 申請（專利權）人: 湖北省農業科學院經濟作物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

技術領域

本發明屬于植物組織培養技術領域，更具體涉及一種山藥苗的快速繁殖方法，是利用基本培養基和附加不同成份對利川山藥苗的快速繁殖方法。

背景技術

湖北利川山藥，在利川市有1500多年的種植歷史，它富含硒、鍺等稀有微量元素，性平味甘、無副作用，是醫療上一種常用中藥，也是人們喜食的一種上乘滋補蔬菜和天然保健品。2007年，利川山藥成為國家質檢總局地理標志保護產品；2008年，利川山藥產地被國家綠色食品中心認定為“全國綠色食品原料標準化生產基地”；2009年，利川山藥獲國家綠色食品認證；同年，在農業部信息中心舉辦的首屆中國農產品區域公用品牌建設論壇上，“利川山藥”的品牌價值為2.32億元；2010年，“龍船水鄉”牌利川山藥獲國家有機轉換食品認證；同年，“龍船水鄉”牌利川山藥被選定為上海世博會專供產品，在國際有機食品博覽會成功簽約160萬美元。利川山藥作為高產高效經濟作物被廣泛種植。

利川山藥一般采用無性繁殖技術，此技術雖然簡單易行，但大都是以根莖作為種源，這在一定程度上減少了產量，且長期營養繁殖，致使其品質退化，農藥殘留嚴重，產量降低。為保證該物種遺傳物質的穩定性，只有通過植物組織培養技術，采用植物營養體進行快速繁殖，才可保持原品種全部的遺傳性，實現該品種種質的一致性。

發明內容

本發明的目的是在于提供了一種山藥苗離體繁殖方法，方法易行，操作方便，繁殖速度快，可加快利川或其它地方山藥快速繁殖。

為了達到上述目的，本發明采用以下技術措施：

一種山藥苗離體繁殖方法，其步驟是：

A、取利川山藥剛長出的10～15cm左右地上莖為外植體，剪成2～4cm左右帶莖節的節段，先用洗衣粉水搖晃浸泡4～6min，再用自來水沖洗干凈，在超凈工作臺上用75%（體積比）的酒精溶液浸泡10～30s，無菌水沖洗，再用0.1%（重量比）升汞溶液消毒3～7min，無菌水沖3～5次；

B、無菌紙吸干外植體表面水分。用滅菌的手術刀將莖切成0.9～1.1cm的帶節莖段。按極性方向豎插于配制好的培養基中。誘導培養基的有效成份為：MS+KT1.5～2.5mg/L+NAA0.1～0.2mg/L+瓊脂4000～6000mg/L+白糖20000～30000mg/L+PVP100～200mg/L；

C、光照培養，溫度為25～28℃，光強1500～3000Lx，每天光照10～16h，培養30～60d，長出叢芽；

D、然后將叢芽切割成數個小叢芽轉入B步驟中的誘導培養基中進行芽的繼代增殖培養，以后每隔25～35d繼代1次。繼代培養過程中將已有3～4片展開葉，苗高4～5cm的健壯小苗轉生根培養基中，使其形成完整植株。生根培養基的有效成份為：1/2MS+BA0.1～0.3mg/L+NAA0.4～0.6mg/L+瓊脂4000～6000mg/L+白糖30000～60000mg/L+活性炭0.1%～0.3%；

E、山藥試管苗接種于生根培養基中30～40d，待葉片4～5片，長2條以上根時即開瓶煉苗5～7d，將瓶內苗輕輕取出，用0.003%～0.005%（重量比）NAA溶液浸苗根基部10～15min，將組培苗移栽到基質（草炭∶珍珠巖∶蛭石=2∶1∶1)）中，澆足定根水，蓋上小拱棚膜保溫保濕，前期溫度保持在15～25℃，濕度80～90%以上，7～15d后逐步揭膜降低溫度，增加光照強度，每隔2～3周澆施0.1%～0.3%（重量比）尿素和0.1%～0.3%（重量比）KH₂PO₄或稀薄糞水，保證棚內生長期肥水管理條件相一致，注意進行病蟲害防治，組培苗成活率達95%以上，將成活苗移栽。

所述的MS培養基的成份(單位：mg/L)：

硝酸氨????????????????????1650

硝酸鉀????????????????????1900

七水硫酸鎂????????????????370

磷酸二氫鉀????????????????170

二水氯化鈣????????????????440

乙二胺四乙酸二鈉??????????37.3

碘化鉀????????????????????0.83

硼酸??????????????????????6.2

四水硫酸錳????????????????22.3

七水硫酸鋅????????????????8.6

二水鉬酸鈉????????????????0.25