[發明專利]一種制備重組人干擾素α2b的發酵培養基及發酵方法

無效

• 申請號: 201310084878.3
• 申請日: 2013-03-18
• 公開（公告）號: CN103146787A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 郭德本;劉芃實;劉長春;賀永山;卡特琳娜·阿爾瓦斯
• 申請（專利權）人: 長春海伯爾生物技術有限責任公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02
• 代理公司: 深圳市君勝知識產權代理事務所 44268
• 代理人: 楊宏

1.一種制備重組人干擾素α2b的發酵培養基，其按照重量份其包括以下組分：

胰蛋白胨25-35份，酵母提取物15-25份，磷酸氫二鈉4-8份，磷酸二氫鉀2-4份，氯化銨0.4-0.6份，氯化鈉0.4-0.6份，硫酸鎂0.?2-0.4份，氯化鈣0.05-0.15份與丙三醇10-20份。

2.根據權利要求1所述的發酵培養基，其特征在于，胰蛋白胨濃度為25-35?g/L，酵母提取物的濃度為15-25?g/L，磷酸氫二鈉濃度為4-8?g/L，磷酸二氫鉀濃度為2-4?g/L，氯化銨濃度為0.4-0.6g/L，氯化鈉濃度為0.4-0.6?g/L，硫酸鎂濃度為0.?2-0.4g/L，氯化鈣濃度為0.05-0.15?g/L與丙三醇濃度為10-20g/L。

3.一種制備重組人干擾素α2b的發酵方法，其包括以下步驟：

A、按照重量份將胰蛋白胨25-35份，酵母提取物15-25份，磷酸氫二鈉4-8份，磷酸二氫鉀2-4份，氯化銨0.4-0.6份，氯化鈉0.4-0.6份，硫酸鎂0.?2-0.4份，氯化鈣0.05-0.15份與丙三醇10-20份加入發酵罐中，并向所述發酵罐中加入注射用水充分混合得到培養基；

B、再向所述發酵罐中加入磷酸與50%的氫氧化鈉溶液，調節所述培養基的PH值到7.0±0.2，然后再將工程菌菌種接種到所述培養基進行培養，所述發酵罐中培養溫度為37℃，得到發酵產物；

C、將所述發酵物采用低溫離心法得到菌體，并對所述菌體進行裂解提純，獲得重組干擾素α2b蛋白。

4.根據權利要求3所述的發酵方法，其特征在于，所述步驟B還包括：

B1、向所述發酵罐中加入所述磷酸，將所述培養基的PH值調節至4.2±0.2，并在121℃條件下滅菌15分鐘；

B2、將滅菌后的所述培養基溫度控制在37℃，然后向所述發酵罐中加入50%的氫氧化鈉溶液，將所述培養基的PH值調整至7.0±0.2；

B3、發酵培養過程中向所述發酵罐中適時加入磷酸與50%的氫氧化鈉溶液，控制所述培養基的PH值為7.0±0.2；隨著細菌生長培養基的溶解氧自90%逐漸降低至零。