[發明專利]一種表皮干細胞活性成分及含有該活性成分的美容制劑

有效

• 申請號: 201310084648.7
• 申請日: 2013-03-18
• 公開（公告）號: CN103142447A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 解軍;李仁科;劉志貞;王登高;王哲;劉丹;郝宇卉;牛勃;楊麗紅;刁海鵬
• 申請（專利權）人: 山西醫科大學
• 主分類號: A61K8/98
• 分類號: A61K8/98;A61K8/64;A61Q19/02;A61Q19/00;A61P17/10
• 代理公司: 太原華弈知識產權代理事務所 14108
• 代理人: 李毅

1.一種表皮干細胞活性成分，所述活性成分由表皮干細胞分泌，存在于培養表皮干細胞所產生的上清中，并以β-1⁺的形式表達β-1。

2.權利要求1表皮干細胞活性成分的獲取方法，是將表皮組織以PBS清洗，剪成1mm×1mm×1mm大小，按照組織與酶液的體積比為1:3，加入溶解在含有雙抗的DMEM中的濃度2.5mg/ml的dispase?II酶液中，將酶液置于4℃冰箱過夜；用200目過濾網過濾細胞，收集濾液，用等量的含10wt%FBS的DMEM中和酶的活性；剩余組織塊以0.25wt%胰酶/EDTA在37℃消化，用200目過濾網過濾細胞，收集濾液；合并兩次濾液，應用磁珠標記的抗β-1抗體，即CD29抗體，以磁珠篩選法篩選出β-1⁺細胞。

3.權利要求2獲得的表皮干細胞活性成分的培養方法，包括：

1)、將分選出的表皮干細胞接種于生長有NIH3T3細胞的培養瓶上，加入5ml表皮干細胞專用培養基，在濕度≥95%，溫度37℃，CO₂體積濃度5%環境下培養，隔2天換液；

2)、待細胞80%融合后，先用0.02wt%EDTA去除NIH3T3細胞，再以0.25wt%胰酶和0.02wt%EDTA消化傳代，將傳代產生的細胞移入新的培養瓶中；

3)、重復以上培養、擴增過程，培養過程中可根據需要調整最佳的細胞數量；

其中，所述的表皮干細胞專用培養基是由DMEM:HAM?F-12=3:1的體積比混合，并含有10wt%FBS?20ng/ml、EGF?5ug/ml、轉鐵蛋白1.8×10^-4mol/l、腺嘌呤1.8×10^-4?mol/l、胰島素5ug/ml和氫化可的松0.4ug/ml，pH＝7.0～7.4。

4.一種包含有權利要求1表皮干細胞活性成分的的霜劑化妝品，由以下重量份數的組分為原料制備得到：羊毛醇3～5、白蜂蠟1～3、鯨蠟5～10、硼砂0.3～0.5、去離子水20～50、表皮干細胞活性成分10～15、DMDM/F12培養基20～55、成纖維細胞生長因子0.02～0.08、表皮細胞生長因子0.05～0.08、SOD3～5。