[發明專利]一種有機添加物對金線蓮產業化快速繁殖關鍵技術

有效

• 申請號: 201310083379.2
• 申請日: 2013-03-16
• 公開（公告）號: CN103190343A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 何碧珠;林蔚;何官榕;肖春梅
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種有機添加物對金線蓮產業化快速繁殖關鍵技術：

所述方法具體步驟包括：

1）取材：外植體材料為野生金線蓮；在春秋季節采摘，采摘后將其用濕布包好帶回實驗室備用；

2）培養基的配制：?

????芽誘導培養基：MS?+BA?0.5-2.0mg·L^-1+KT?0.5-2mg·L^-1+NAA?0.5-2mg·L^-1?+?蔗糖30g·L^-1+活性炭?1-2g·L^-1+瓊脂?6.5g·L^-1；

????叢芽誘導培養基：MS+BA?0.5-3mg·L^-1?+KT?0.5-2mg·L^-1?+NAA?0.5-2mg·L^-1?+蔗糖30g·L^-1?+香蕉汁?50-150?g·L^-1?+蛋白胨?0.5-2.5g·L^-1?+活性炭?1-2g·L^-1?+瓊脂6.5g·L^-1；?

芽增殖培養基：1/2MS+BA?0.5-3mg·L^-1?+KT?0.5-2mg·L^-1+NAA?0.5-2mg·L^-1?+香蕉汁50-?150?g·L^-1?+蛋白胨?0.5-2.5g·L^-1?+花寶1號0.5-1.5g·L^-1?+蔗糖30g·L^-1?+活性炭0.5-1.5g·L^-1?+瓊脂?6.5g·L^-1；

生根培養基：1/3MS+?IBA?0.5-1mg·L^-1?+NAA?0.5-1mg·L^-1?+馬鈴薯漿50-?150?g·L^-1?+蔗糖30g·L^-1?+活性炭?0.5-2g·L^-1+瓊脂6.5g·L^-1；

所述香蕉汁的制備方法為：將香蕉去皮后粉碎成泥狀；

所述馬鈴薯漿的制備方法為：將馬鈴薯去皮后粉碎成漿狀；

3）材料消毒處理：將采集的野生金線蓮用自來水沖洗干凈，在距離芽點1-2厘米處剪取莖段，去除多余的葉片，置飽和漂白粉上清液中漂洗15min并用軟毛刷輕輕刷洗，沖洗干凈后，置于流水中沖滴0.5-1小時，再用雙蒸水沖洗2-3次，在超凈工作臺內用75%的酒精消毒30s，加入0.1wt%HgCl₂處理5-10min；再用無菌水沖4-6遍后置工作臺備用；

4）芽誘導培養：將消毒后的材料放在滅過菌的培養皿上，用手術刀切掉與升汞接觸的切口部分0.2-0.4cm，然后將材料切成1-2cm?長的莖段分別接種于經高溫、高壓滅菌的誘導培養基中；培養條件：培養室溫度為23±2℃，光照時間12h/d，光照強度500-1000lx,?芽誘導培養30天；得到叢生芽；

5)?增殖培養：將經步驟4）誘導培養所得到的叢生芽切開并剪成長度為1.5-2cm，分別接種在增殖培養基中；接種時將莖段平放在培養基上，經過50-70d增殖培養，將增殖后的叢生芽切割為芽數為5-10個的莖段進行為期50-70d的擴大增殖培養；整個過程的培養室溫度為23±2℃，光照時間12h/d，光照強度1500-2000lx；

?6)?誘導生根：將經步驟5）增殖培養出來的幼苗單株切下，帶有2-3片葉子，株高1-2cm，轉移到生根培養基中；生根培養時間為30天，培養室溫度為23±2℃，光照時間12h/d，光照強度1500-2000lx；

7)?瓶苗移栽：經步驟6)誘導生根后，當植株長至10cm時，將試管苗放在自然光下煉苗3-5天后，再打開瓶蓋煉苗2-3天，然后從培養瓶中取出，洗去附著在根系的培養基，移入質量比蛭石和腐殖土質量比為1：2的混合基質中，溫度控制在15-28℃，濕度保持在70％-85％之間，避免陽光直射，透光率50%-60%。

2.一種有機添加物對金線蓮產業化快速繁殖關鍵技術,其特征在于，所述金線蓮為采集自福建省漳州南靖縣樹海森林的野生金線蓮。