[發明專利]植物油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法

有效

• 申請號: 201310083326.0
• 申請日: 2013-03-15
• 公開（公告）號: CN103149303A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 耿樹香;張艷麗;李勇杰;馬婷;肖良俊;谷麗萍;賀娜;王洋;廖永堅;陳海云;徐玉梅;寧德魯
• 申請（專利權）人: 云南省林業科學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司 53100
• 代理人: 徐玲菊

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技術領域

本發明涉及一種植物成分測定方法，尤其是一種橄欖油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法，屬于分析化學技術領域。

技術背景

在植物提取、植物成分分析中，常常涉及到植物油中主要脂肪酸及功能性成分的測定。現有的技術標準都以繁瑣、復雜的操作，且需要多種有毒試劑（如濃硫酸、石油醚、苯、乙醚等）配合的甲酯化方法，來進行橄欖油的前期處理的，由于處理效果不理想，當將處理過的橄欖油送入氣相色譜儀中分析時，會導致色譜峰不出現，或脂肪酸與角鯊烯兩主要成分的分離效果不理想，而且分離橄欖油中的主要脂肪酸成分及功能性成分時，還需要極性不同的兩根毛細管柱，即脂肪酸分析要使用極性柱，而功能性成分角鯊烯的分析則要用非極性柱，且分離橄欖油中脂肪酸與角鯊烯的前期處理方法也不同，即分離兩種成分需兩種甲酯化方法。因而是一直以來造成植物提取分析成本居高不下、分析準確性不足的主要原因。因此，完全有必要對現有技術加以改進。

發明內容

為克服現有技術中，植物油脂肪酸甲酯化方法存在的繁瑣、復雜操作，費時、費力，且要使用有害、有毒試劑，成本高，資源浪費嚴重等不足，本發明提供一種方便、快捷，成本低，樣品只需一次前期處理，用同一根色譜柱即可實現植物油中主要脂肪酸及功能性成分角鯊烯的分離測定方法。

本發明通過下列技術方案實現：一種植物油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法，其特征在于經過下列步驟：?

A、按35~50mL/g植物油的量，在植物油中加入正已烷，使植物油完全溶解，再按5.5~7.5mL/g植物油的量，加入濃度為2mol/L的氫氧化鉀與甲醇的混合溶液，振蕩3～5min，離心分離5～8min，得上層試樣液；

B、將步驟A所得試樣液送氣相色譜儀中進行GC、MS分析，并按常規用面積歸一化法計算得到各脂肪酸成分和功能性成分角鯊烯的百分含量，其中：

GC?分析條件：一根HP-5MS石英毛細管柱；程序升溫：按3℃?/min?的升溫速率升溫至300℃；進樣口溫度290℃；柱流量1.0mL/min；柱前壓100kPa；進樣量0.5～1.0μL；分流比10∶1；載氣為高純氦氣；

MS分析條件：電離方式EI；電子能量70；傳輸線溫度250℃；離子源溫度230℃；四極桿溫度150℃；質量范圍35~500；采用wiley7n.1標準譜庫進行檢索定性。

所述正已烷、氫氧化鉀及甲醇均為市購的色譜級產品。?

所述步驟B的氣相色譜儀型號為HP6890GC/5973MS氣相色譜—質譜聯用儀。

本發明具有下列優點和效果：采用上述方案測定植物油中主要脂肪酸和角鯊烯時，其甲酯化方法快速、簡捷，且使用的溶劑量小，對人體健康無任何危害，易于回收利用，批量生產時可大大降低溶劑成本，縮短時間，減少不必要的浪費，節約資源，同時使用該方法時，樣品脂肪酸的萃取及脂肪酸的甲酯化是同步完成的，同時角鯊烯被很好地萃取于溶劑中，所選擇的非極性毛細管柱在同一升溫程序中對角鯊烯與各脂肪酸甲酯的分離良好，定量準確，并實現了更低的檢出限。運用GC-MS與角鯊烯標準樣品法測定橄欖油中角鯊烯的含量，其方法的精密度和準確度好，能達到所需要的檢測目的，此法也適用于其它植物油中脂肪酸與角鯊烯含量的檢測。

附圖說明

圖1為本發明橄欖油氣相色譜圖。

圖1中可知，本發明方法只需要35min就可同時完成植物油中主要脂肪酸成分和功能性成分角鯊烯的分離，分離效果良好，常規方法則需3倍以上時間（35min的三倍時間）才能實現植物油中主要脂肪酸與功能性成分的分離，其中還不包括換柱子及平衡時間還有樣品前處理時間；甲酯化時間只需15min，而常規方法的脂肪酸甲酯化時間約需60~90min；一個植物油樣的分析只需50~60min，常規方法則需100~130min，兩種成分則需200~260min。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明做進一步說明。

實施例1

一種橄欖油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法，其特征在于經過下列步驟：?

A、按35mL?/g橄欖油的量，在40mg橄欖油中加入正已烷2ml，使橄欖油完全溶解，再按5.5mL/g橄欖油的量，加入濃度為2mol/L的氫氧化鉀與甲醇的混合溶液0.3mL，振蕩3min，離心分離5min，得上層試樣液；