[發明專利]一種蘿卜原花青素二聚體的制備方法

無效

• 申請號: 201310082641.1
• 申請日: 2013-03-05
• 公開（公告）號: CN103145680A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 張杰;劉慶海;周小華
• 申請（專利權）人: 重慶海巨農業發展有限公司;重慶大學
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種蘿卜原花青素二聚體的制備方法，其具體步驟如下：

(1)制備蘿卜原花青素低聚體溶液

以市售蘿卜紅色素為原料，先按照純凈水∶無水乙醇∶異丙醇的體積比為1mL∶6～8mL∶13～11mL的比例，將純凈水、無水乙醇和異丙醇混合均勻，制備出乙醇-異丙醇-水溶液，隨后按照蘿卜紅色素質量∶乙醇-異丙醇-水溶液之比為1g∶50～200mL的比例，向乙醇-異丙醇-水溶液中加入蘿卜紅色素，攪拌溶解5～20分鐘，將該懸濁液進行真空過濾，分別收集濾過液和濾渣，濾過液即為蘿卜原花青素低聚體溶液；

(2)制備蘿卜原花青素低聚體納濾液

第(1)步完成后，將第(1)步制備出的蘿卜原花青素低聚體溶液，泵入截留分子量為800～1200Da的納濾器中，在0.2～0.4MPa下，進行納濾分離，直至納濾截留液的體積為原體積的20～30％時止，收集納濾截留液與濾過液；將收集的納濾截留液，補充第(1)步制備的乙醇-異丙醇-水溶液至原體積，在0.2～0.4MPa下，進行第二次納濾分離，至第二次納濾截留液的體積減少至原體積的5～15％時止；并將兩次收集的納濾濾過液合并，即為蘿卜原花青素低聚體納濾液；

(3)制備聚酰胺樹脂粉末壓力層析柱

第(2)步完成后，以市售30～60目聚酰胺樹脂為原料，將其裝入超微粉碎機中，進行超微粉碎處理；再用分樣篩進行篩分處理；選取粒徑在13～25微米之間的聚酰胺樹脂粉末，分散于純凈水中，并裝配成聚酰胺樹脂粉末壓力層析柱，再用與聚酰胺樹脂粉末等體積的純凈水進行反沖；

(4)制備蘿卜原花青素二聚體溶液

第(3)步完成后，按照聚酰胺樹脂粉末體積∶蘿卜原花青素低聚體納濾液體積比為1mL∶8～12mL的比例，在0.5～0.8MPa條件下，將第(2)步收集的蘿卜原花青素低聚體納濾液泵入第(3)步裝配的聚酰胺樹脂粉末壓力層析柱中，直至流出液為淺紅色為止，用2倍于聚酰胺樹脂粉末壓力層析柱體積的純凈水進行洗滌，純凈水的流速為聚酰胺樹脂粉末壓力層析柱體積的3～6倍/小時，先用質量濃度為40～60％的乙醇溶液進行第一次洗脫，以洗脫蘿卜原花青素二聚體，第一次洗脫液的流速為聚酰胺樹脂粉末壓力層析柱體積的3～6倍/小時，直至洗脫液無紅色時為止，收集第一次的洗脫液，即為蘿卜原花青素二聚體溶液；隨后用甲酸∶質量濃度70～80％的乙醇溶液之比為1mL∶110～140mL的溶液進行第二次洗脫，直至洗脫液無色時止，第二次洗脫液的流速為聚酰胺樹脂粉末壓力層析柱體積的3～6倍/小時；第二次的洗脫液經濃縮、凍干制成凍干粉，即為蘿卜紅色素單聚體，向第二次洗脫后的聚酰胺樹脂粉末壓力層析柱中，泵入2倍聚酰胺樹脂粉末壓力層析柱體積的純凈水進行清洗，純凈水的泵入速度為聚酰胺樹脂粉末壓力層析柱體積的3～6倍/小時；

(5)制備蘿卜原花青素二聚體粉末

第(4)步完成后，將第(4)步得到的蘿卜原花青素二聚體溶液泵入到真空薄膜蒸發器中，在真空度為0.09～0.095MPa、溫度為20～30℃條件下，進行真空薄膜蒸發，直到溶液中蘿卜原花青素二聚體含量達25～35％時止；原花青素二聚體濃縮液置于-16～-20℃溫度下，預凍3～5小時，再放置于冷凍干燥機中，在真空度為20～40Pa、溫度為-50～-60℃條件下，進行冷凍干燥24～36小時，就制備出純度達95.2～98.4％，分子量為960.4Da的蘿卜原花青素二聚體粉末，總收得率為88.7～92.6％。