[發(fā)明專利]一種高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310079983.8
• 申請日: 2013-03-13
• 公開（公告）號: CN103163128A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 霍丹群;蔣蘭;侯長軍;王洪彬
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶大學(xué)
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/33
• 代理公司: 重慶博凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 50212
• 代理人: 張先蕓;梁展湖

1.一種高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測定方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1：制備支鏈淀粉回歸方程和直鏈淀粉回歸方程，該步驟包括：

S11：取支鏈淀粉純品和直鏈淀粉純品分別置于容器中，分別向兩個容器中加入乙醇溶液進行分散處理，處理后加入氫氧化鈉溶液混勻，封住容器口，沸水浴中攪拌使直鏈淀粉純品和支鏈淀粉純品完全溶解，然后使用蒸餾水定容即得支鏈淀粉初配溶液和直鏈淀粉初配溶液；

S12：制備支鏈淀粉回歸方程，取多份步驟S11中配置的支鏈淀粉初配溶液，調(diào)節(jié)該多份支鏈淀粉初配溶液的pH值至3～4，再加碘試劑，并用蒸餾水定容，最終得到支鏈淀粉濃度為40～90ug/mL的支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，靜置，以碘為空白，進行紫外掃描得到支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中濃度不同的各份支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液對400～800nm波長紫外線的吸光度，然后以濃度不同的各份支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以其吸光度為縱坐標(biāo)制得支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線得到支鏈淀粉回歸方程；

S13：制備直鏈淀粉回歸方程，取多份步驟S11中配置的直鏈淀粉初配溶液，調(diào)節(jié)該多份直鏈淀粉初配溶液的pH值至3～4，再加碘試劑，并用蒸餾水定容，最終得到直鏈淀粉濃度為6～26ug/mL的直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，靜置，以碘為空白，進行紫外掃描，得到直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中濃度不同的各份直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液對400～800nm波長紫外線的吸光度，然后以濃度不同的各份直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以其吸光度為縱坐標(biāo)制得直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線得到直鏈淀粉回歸方程；

S2：計算支鏈淀粉的吸收比α和直鏈淀粉的吸收比β：

將波長λ1作為支鏈淀粉的測定波長，波長λ2作為直鏈淀粉的測定波長，λ1和λ2為400～800nm的范圍內(nèi)，然后分別測定支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列和直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中濃度不同的各份標(biāo)準(zhǔn)溶液在λ1及λ2處的吸光度，根據(jù)式（1）和（2）分別計算α_j和β_i，然后再對得到的多個α_j利用統(tǒng)計學(xué)求平均值得到支鏈淀粉的吸收比α，對得到的多個β_i利用統(tǒng)計學(xué)求平均值得到直鏈淀粉的吸收比β：

其中，α_j表示支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中第j份標(biāo)準(zhǔn)溶液中支鏈淀粉的吸收比，j∈(1,...,J)，J表示支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中標(biāo)準(zhǔn)溶液的份數(shù)，A_jλ2^支表示支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中第j份標(biāo)準(zhǔn)溶液在波長為λ2處的吸光度，A_jλ1^支表示支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中第j份標(biāo)準(zhǔn)溶液在波長為λ1處的吸光度，β_i表示直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中第i份標(biāo)準(zhǔn)溶液中直鏈淀粉的吸收比，i∈(1,...,I)，I表示直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中標(biāo)準(zhǔn)溶液的份數(shù)，A_iλ1^直表示直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中第i份標(biāo)準(zhǔn)溶液在波長為λ1處的吸光度，A_iλ2^直表示直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中第i份標(biāo)準(zhǔn)溶液在波長為λ2處的吸光度；

S3：樣品測定：秤取經(jīng)粉碎脫脂后的高粱淀粉樣品，加入乙醇溶液進行分散處理，處理后加入氫氧化鈉溶液混勻，然后在沸水浴中分散淀粉至均勻，冷卻至室溫后，使用蒸餾水定容得到高粱淀粉樣品溶液；然后根據(jù)式（3）和（4）分別計算高粱淀粉樣品溶液中支鏈淀粉在波長λ1處的吸光度A_λ1^直，直鏈淀粉在波長λ2處的吸光度A_λ2^支；最后將A_λ2^支代入支鏈淀粉回歸方程即得高粱淀粉樣品中支鏈淀粉的濃度，將A_λ1^直代入直鏈淀粉回歸方程即得高粱淀粉樣品中直鏈淀粉的濃度；

其中，A_λ1^支+直表示高粱淀粉樣品溶液在波長λ1處的總的吸光度，A_λ2^支+直表示高粱淀粉樣品溶液在波長λ2處的總的吸光度。

2.如權(quán)利要求1所述的高粱中支鏈淀粉和直鏈淀粉含量的測定方法，其特征在于，所述支鏈淀粉的測定波長λ1為450～600nm，直鏈淀粉的測定波長λ2為550～700nm。