[發(fā)明專(zhuān)利]以改性核桃殼為載體的固定化脂肪酶的制備方法無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310070061.0 | 申請(qǐng)日： | 2013-03-06 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN103131692A | 公開(kāi)（公告）日： | 2013-06-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 余旭亞;鄧濤;夏雪山;游金坤 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 昆明理工大學(xué) |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12N11/14 | 分類(lèi)號(hào)： | C12N11/14 |
| 代理公司： | 暫無(wú)信息 | 代理人： | 暫無(wú)信息 |
| 地址： | 650093 云*** | 國(guó)省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 改性 核桃殼 載體 固定 脂肪酶 制備 方法 | ||
1.以改性核桃殼為載體的固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）核桃殼活性炭的制備：將核桃殼粉碎，按固液比為1:2-5的比例向核桃殼中加入質(zhì)量百分比濃度為20-60%的活性劑，在40-60℃的條件下浸漬20-30h，然后將浸漬后的核桃殼置于馬弗爐中，先在300-400℃的條件炭化60-120min，然后在500-700℃的條件下活化30-90min，取出核桃殼用鹽酸溶液清洗2-3次后再用去離子水洗滌至中性，即得核桃殼活性炭，烘干備用；
（2）核桃殼活性炭的硅烷化處理：按每克核桃殼活性炭添加3-4ml環(huán)己烷和0.02-0.04?mL硅烷化試劑的比例，在核桃殼活性炭中加入環(huán)己烷和硅烷化試劑，充分混勻后，在溫度為50-70℃條件下振蕩1-2h，待反應(yīng)結(jié)束后，過(guò)濾，濾渣用環(huán)己烷洗滌，烘干，粉碎分篩至20-120目，即得改性核桃殼；?
（3）脂肪酶的固定化：按給酶量為5-25mg/g的比例向脂肪酶溶液中加入20-120目改性核桃殼，密封，在20-40℃下振蕩固定1-5h后，抽濾，濾渣用緩沖液洗滌直至沒(méi)有蛋白洗脫下來(lái)，然后冷凍干燥，即得到固定化脂肪酶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述以改性核桃殼為載體的固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于：活性劑為磷酸或者氯化鋅。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述以改性核桃殼為載體的固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于：鹽酸濃度為1-3mol/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述以改性核桃殼為載體的固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于：硅烷化試劑為三甲基氯硅烷、甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷、3-氨丙基三乙氧基硅烷中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述以改性核桃殼為載體的固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于：脂肪酶溶液為脂肪酶和pH值為4-8的緩沖液混合制得的溶液，其中緩沖液是濃度為0.02-0.05mol/L的磷酸鹽緩沖溶液或醋酸鹽緩沖溶液。
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