[發(fā)明專利]細胞核移植

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310068569.7
• 申請日: 2006-09-08
• 公開（公告）號: CN103205463A
• 公開（公告）日: 2013-07-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 杜玉濤;G·瓦吉塔;L·A·伯朗德;P·M·克萊
• 申請（專利權(quán)）人: 奧爾胡斯大學(xué)
• 主分類號: C12N15/873
• 分類號: C12N15/873;A01K67/027;A01N1/02;C12N5/10
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 陳軼蘭

1.細胞核移植方法，其包括以下步驟:

a．構(gòu)建具有至少一部分經(jīng)修飾的透明帶的至少一個卵母細胞，

b．將該卵母細胞分成至少2部分，從而獲得至少一個細胞質(zhì)體，

c．構(gòu)建具有所需遺傳特性的供體細胞或細胞核，

d．將至少一個細胞質(zhì)體與該供體細胞或膜包圍的細胞核融合，

e．得到重建的胚胎。

2.細胞核移植方法，其包括以下步驟:

a．構(gòu)建至少一個卵母細胞，

b．將該卵母細胞分成至少3部分，從而獲得至少2個細胞質(zhì)體，

c．構(gòu)建具有所需遺傳特性的供體細胞或細胞核，

d．將至少一個細胞質(zhì)體與該供體細胞或膜包圍的細胞核融合，

e．得到重建的胚胎。

3.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中至少一部分透明帶被部分地去除。

4.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中至少一部分透明帶被酶促部分地去除。

5.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中卵母細胞分成至少3部分，從而獲得至少2個細胞質(zhì)體。

6.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中通過突變、缺失和/或插入對所需一個或多個基因進行修飾而獲得供體細胞或細胞核的所需遺傳特性。

7.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中融合方法選自化學(xué)融合、電融合和生物融合。

8.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中融合以至少一步進行。

9.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中融合以至少兩步進行。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中融合的第一步位于至少一個細胞質(zhì)體和供體細胞或膜包圍的細胞核之間。

11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中融合的第二步位于權(quán)利要求8的至少一個融合對和至少一個細胞質(zhì)體之間。

12.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中供體細胞是體細胞。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中體細胞選自如下構(gòu)成的組：上皮細胞，神經(jīng)細胞、表皮細胞、角質(zhì)形成細胞、造血細胞、黑素細胞、軟骨細胞、淋巴細胞（B和T淋巴細胞）、紅細胞、巨噬細胞、單核細胞、單核的細胞、成纖維細胞、心肌細胞和其它肌細胞。

14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中體細胞從以下構(gòu)成的組中獲得：皮膚細胞、肺細胞、胰腺細胞、肝臟細胞、胃細胞、腸細胞、心臟細胞、生殖器官細胞、膀胱細胞、腎臟細胞、尿道細胞和其它泌尿器官細胞。

15.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中體細胞是成纖維細胞。

16.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中體細胞是來源于哺乳動物的成纖維細胞。

17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中哺乳動物是豬。

18.根據(jù)權(quán)利要求1和/或權(quán)利要求2所述的方法，其中供體細胞來源于生殖系細胞。

19.根據(jù)以上任一項權(quán)利要求所述的方法，其中卵母細胞來源于豬。

20.產(chǎn)生遺傳修飾的或轉(zhuǎn)基因的非人類哺乳動物的方法，其包括如下步驟：

a．構(gòu)建具有至少一部分經(jīng)修飾的透明帶的至少一個卵母細胞，

b．將該卵母細胞分成至少2部分，從而獲得具有核的卵母細胞和至少一個細胞質(zhì)體，

c．構(gòu)建具有所需遺傳特性的供體細胞或細胞核，

d．將至少一個細胞質(zhì)體與該供體細胞或膜包圍的細胞核融合，

e．得到重建的胚胎，

f．活化該重建的胚胎以形成胚胎，

g．培養(yǎng)所述胚胎，以及

h．將所述培養(yǎng)的胚胎轉(zhuǎn)移到寄主哺乳動物中，使得該胚胎發(fā)育成遺傳修飾的胎兒。