[發明專利]同時檢測食品中的丙烯酰胺和雜環胺的方法

有效

• 申請號: 201310068422.8
• 申請日: 2013-03-04
• 公開（公告）號: CN103149316A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 歐陽運富;靳藝;唐宏兵;吳英;李貴英;趙立凡
• 申請（專利權）人: 常州市疾病預防控制中心
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 常州市江海陽光知識產權代理有限公司 32214
• 代理人: 孫曉暉

技術領域

本發明屬于食品安全技術領域，具體涉及一種同時檢測食品中的丙烯酰胺和雜環胺的方法。

背景技術

丙烯酰胺（Acrylamide，簡稱AA）是一種不飽和酰胺，呈無色透明狀結晶，室溫下穩定，易燃，毒性很大，對中樞神經系統有危害，且可能致癌。2002年4月瑞典國家食品管理局和斯德哥爾摩大學研究人員率先報道，在一些油炸和燒烤的淀粉類食品，如炸薯條、炸土豆片等中檢出丙烯酰胺，而且含量超過飲水中允許最大限量的500多倍。之后挪威、英國、瑞士和美國等國家也相繼報道了類似結果。

中國專利文獻CN101303304A公開了一種食品中丙烯酰胺的檢測方法，包括：樣品前處理：將研磨成粉的樣品放入容器中，加入正己烷，超聲脫脂后，吹干殘留的正己烷，得產物A。丙烯酰胺的提取：在產物A中加入氯化鈉溶液，超聲萃取，離心后的殘渣用氯化鈉溶液重復萃取一次，合并萃取液。在萃取液中加入氫氧化鈉溶液，再加入次氯酸鈉溶液，反應后的混合溶液用磷酸鹽緩沖溶液調節混合溶液為堿性，最后加入熒光胺溶液，混勻反應。將所得混合液放入熒光儀中檢測。

雜環胺是一類在肉類、家禽、魚類等蛋白質豐富的食物烹調加工時產生的具有致突變性、致癌性的物質。至今已從烹調食品中分離鑒定了20多種雜環胺，主要包括氨基咔啉類和氨基咪唑氮雜芳烴類，而氨基咪唑氮雜芳烴類又包括喹啉類（如2-氨基-3-甲基咪唑[4,5-f]喹啉，簡稱IQ）、喹喔啉類（如2-氨基-3,8-二甲基咪唑[4,5-f]喹喔啉，簡稱MeIQx）以及吡啶類（如2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑[4,5-b]吡啶，簡稱PhIP）。

《現代科學儀器》2010年12月第6期第145～149頁公開了一種食品中雜環胺檢測的分析方法，包括樣品前處理方法和檢測方法。其中樣品前處理方法包括液液萃取、超臨界流體萃取、固相微萃取以及在線串聯液液萃取和固相萃取等，檢測方法則包括氣相色譜-質譜法（GC-MS）和高效液相色譜-質譜法（LC-MS）兩種。其中高效液相色譜-質譜法中的質譜法主要是熱噴霧質譜（TSI-MS）、電噴霧質譜（ESI-MS）或者大氣壓化學電離質譜（APCI-MS）。

目前，尚未發現將加速溶劑萃取以及離子阱-飛行時間串聯質譜應用到同時檢測食品中的丙烯酰胺和雜環胺上的文獻報道。

發明內容

本發明的目的在于解決上述問題，提供一種同時檢測食品中的丙烯酰胺和雜環胺的方法。

實現本發明目的的技術方案是：一種同時檢測食品中的丙烯酰胺和雜環胺的方法，具有以下步驟：

①樣品前處理。

采用加速溶劑萃取技術對含有丙烯酰胺和雜環胺的待測樣品進行樣品前處理。

其中，采用的萃取溶劑為乙腈、乙腈/二氯甲烷、乙酸乙酯、二氯甲烷/丙酮、或者甲苯/二氯甲烷，萃取的溫度為60℃～120℃。

由于萃取溶劑的種類對于目標物的提取效率有著顯著影響。因此，為了降低基質干擾，從而獲得較佳的提取效率，步驟①中采用的萃取溶劑優選乙腈或者乙腈/二氯甲烷；而為了進一步降低基質干擾，從而獲得最佳的提取效率，步驟①中采用的萃取溶劑優選乙腈。

萃取的溫度同樣也是加速溶劑萃取技術中一個重要參數，提高萃取溫度可以降低萃取溶劑的粘度和表面張力，增強萃取溶劑浸潤基質和溶解目標分析物的能力，從而提高目標物的溶出率；但是較高的溫度也會帶來選擇性降低、目標物降解等不足。因此，為了獲得較佳的目標物的溶出率以及較低的目標物的降解，萃取的溫度優選75℃～85℃；而為了獲得最佳的目標物的溶出率以及最低的目標物的降解，萃取的溫度更優選80℃。

由于食品基質較為復雜，直接萃取得到的萃取液不是很清亮，回收率欠佳，因此，步驟①的樣品前處理還包括在萃取前向萃取溶劑中加入氧化鋁，這樣可以對待測樣品進行凈化，有效吸附食品中的油脂等雜質，從而降低萃取液的雜質。而經氧化鋁凈化后得到的萃取液無需采用其它凈化措施（如固相萃取等）便可獲得理想的結果。

氧化鋁的加入量較低的話，凈化效果不佳；氧化鋁的加入量較高的話，不但凈化效果沒有明顯改變，反而增加了對目標物的吸附，從而降低了萃取效率。因此，為了在獲得較佳的凈化效果的同時降低對目標物的吸附，氧化鋁的加入量為待測樣品重量的1～3倍，而當氧化鋁的加入量為待測樣品重量的2倍時，萃取液最為清亮，目標物的萃取效率也最高。

只進行一次萃取，還有部分目標物殘留在萃取池中，萃取效果不理想；而重復萃取2次后，即可達到萃取平衡，獲得最佳的萃取效果。因此，上述步驟①的樣品前處理的萃取次數為2次，也即再重復萃取1次。

②超高效液相色譜。