[發明專利]核酸和檢測轉基因水稻B2A68及其衍生系的方法以及試劑盒及其用途有效
| 申請號： | 201310068126.8 | 申請日： | 2013-03-04 |
| 公開（公告）號： | CN104031912B | 公開（公告）日： | 2017-05-03 |
| 發明（設計）人： | 肖國櫻;蔣利平;翁綠水 | 申請（專利權）人： | 中國科學院亞熱帶農業生態研究所 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京潤平知識產權代理有限公司11283 | 代理人： | 王鳳桐,周建秋 |
| 地址： | 410125*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 核酸 檢測 轉基因 水稻 b2a68 及其 衍生 方法 以及 試劑盒 用途 | ||
1.一種核酸，該核酸為轉基因水稻B2A68的旁側序列所示的核酸，所述轉基因水稻B2A68的旁側序列為SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.1的片段，SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.6的片段；其中，SEQ ID NO.1的片段至少包括SEQ ID NO.1的第100-141位的序列，SEQ ID NO.6的片段至少包括SEQ ID NO.6的第1520-1561位的序列。
2.根據權利要求1所述的核酸，所述SEQ ID NO.1的片段至少包括SEQ ID NO.1的第90-151位的序列。
3.根據權利要求1或2所述的核酸，所述SEQ ID NO.1的片段至少包括SEQ ID NO.1的第80-161位的序列。
4.根據權利要求1所述的核酸，所述SEQ ID NO.6的片段至少包括SEQ ID NO.6的第1510-1571位的序列。
5.根據權利要求1或4所述的核酸，所述SEQ ID NO.6的片段至少包括SEQ ID NO.6的第1500-1581位的序列。
6.一種檢測轉基因水稻的方法，該轉基因水稻為轉基因水稻B2A68或者由B2A68雜交產生的含有權利要求1-5中任意一項所述的核酸的轉基因水稻B2A68的衍生系，該方法包括：
(1)使用針對權利要求1-5中任意一項所述的核酸的特異性引物，對取自待測水稻的核酸樣品進行PCR擴增，得到PCR擴增后的產物；
(2)檢驗所述PCR擴增后的產物中是否含有所述特異性引物擴增產生的特異性目的片段；如果所述PCR擴增后的產物中含有所述特異性目的片段，則指示所述待測水稻為所述轉基因水稻B2A68或者由B2A68雜交產生的含有權利要求1-5中任意一項所述的核酸的轉基因水稻B2A68的衍生系。
7.根據權利要求6所述的方法，其中，所述特異性引物為SEQ ID NO.16所示的核酸和SEQ ID NO.17所示的核酸；所述特異性引物擴增產生的目的片段的長度為307bp。
8.根據權利要求7所述的方法，其中，PCR擴增的條件包括退火溫度為55-60℃。
9.根據權利要求6所述的方法，其中，所述特異性引物為SEQ ID NO.18所示的核酸和SEQ ID NO.19所示的核酸；所述特異性引物擴增產生的目的片段的長度為521bp。
10.根據權利要求9所述的方法，其中，PCR擴增的條件包括退火溫度為52-58℃。
11.一種試劑盒，該試劑盒包括右側特異性引物和/或左側特異性引物，其中，所述右側特異性引物為SEQ ID NO.16所示的核酸和SEQ ID NO.17所示的核酸；所述左側特異性引物為SEQ ID NO.18所示的核酸和SEQ ID NO.19所示的核酸。
12.根據權利要求11所述的試劑盒，其中，所述試劑盒還包括陽性對照核酸，所述陽性對照核酸為SEQ ID NO.1所示的核酸和/或SEQ ID NO.6所示的核酸。
13.根據權利要求11或12所述的試劑盒，其中，所述試劑盒還包括dNTPs、PCR緩沖液和耐高溫DNA聚合酶。
14.權利要求11-13中任意一項所述的試劑盒在檢測轉基因水稻B2A68或者由B2A68雜交產生的含有權利要求1-5中任意一項所述的核酸的轉基因水稻B2A68的衍生系中的用途。
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