[發明專利]一種產油酵母脂肪酸合酶及其編碼基因與應用

有效

• 申請號: 201310067825.0
• 申請日: 2013-03-04
• 公開（公告）號: CN104031896A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發明（設計）人: 趙宗保;朱志偉;張素芳
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12R1/645
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 陳曉娜

1.一種產油酵母脂肪酸合酶，其由RtFAS1亞基和RtFAS2亞基組成，其中所述RtFAS1亞基是如下(a)或(b)的蛋白質：

(a)由SEQ?ID?NO：1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

(b)將SEQ?ID?NO：1的氨基酸經過一個或幾個氨基酸的取代和/或缺失和/或添加且與具有脂肪酸合酶亞基1功能的由SEQ?ID?NO：1所衍生的蛋白質；

所述RtFAS2亞基是如下(c)或(d)的蛋白質：

(c)由SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

(d)將SEQ?ID?NO：2的氨基酸經過一個或幾個氨基酸的取代和/或缺失和/或添加且與具有脂肪酸合酶亞基2功能的由SEQ?ID?NO：2所衍生的蛋白質。

2.根據權利要求1所述的產油酵母脂肪酸合酶，其中所述RtFAS1亞基的氨基酸序列為SEQ?ID?NO：1，所述RtFAS2亞基的氨基酸序列為SEQ?ID?NO：2。

3.一種來源于權利要求1所述的產油酵母脂肪酸合酶的生物活性多肽片段或結構域，所述多肽片段或結構域的氨基酸序列為選自如下片段中的任意一個或者任意兩個或更多個片段的組合：

SEQ?ID?NO：1的位置190-599，

SEQ?ID?NO：1的位置611-1142，

SEQ?ID?NO：2的位置60-490，

SEQ?ID?NO：2的位置493-885，

SEQ?ID?NO：2的位置1021-1186，

SEQ?ID?NO：2的位置1212-1378，

SEQ?ID?NO：2的位置1725-1983，

SEQ?ID?NO：2的位置2066-2716，和

SEQ?ID?NO：2的位置2815-2926。

4.權利要求3所述的產油酵母脂肪酸合酶的生物活性多肽片段或結構域，其生物活性選自單酰/乙酰轉移酶(AT)活性、烯酰ACP還原酶(ER)活性、脫水酶(DH)活性、丙二酰/棕櫚酰轉移酶(MPT)活性、第一?；d體蛋白(ACP)活性、第二?；d體蛋白(ACP)活性、酮脂酰還原酶(KR)活性、酮酯-酰基ACP合酶(KS)活性或磷酸泛酰巰基乙胺基轉移酶(PPT)活性中的任一種或者任兩種或更多種的組合。

5.編碼權利要求1所述的產油酵母脂肪酸合酶的核苷酸序列。

6.根據權利要求5所述的核苷酸序列，其中編碼所述產油酵母脂肪酸合酶的RtFAS1亞基的核苷酸序列為SEQ?ID?NO：3；編碼所述產油酵母脂肪酸合酶的RtFAS2亞基的核苷酸序列為SEQ?ID?NO：4。

7.編碼權利要求3所述的產油酵母脂肪酸合酶的生物活性多肽片段或結構域的核苷酸序列，其選自如下核苷酸序列中的任意一個或者任意兩個或更多個序列的組合：

(a)如SEQ?ID?NO：5所示的核苷酸序列，其編碼RtFAS1亞基的AT結構域；

(b)如SEQ?ID?NO：6所示的核苷酸序列，其編碼RtFAS1亞基的ER結構域；

(c)如SEQ?ID?NO：7所示的核苷酸序列，其編碼RtFAS2亞基的DH結構域；

(d)如SEQ?ID?NO：8所示的核苷酸序列，其編碼RtFAS2亞基的MPT結構域；

(e)如SEQ?ID?NO：9所示的核苷酸序列，其編碼RtFAS2亞基的第一ACP結構域；

(f)如SEQ?ID?NO：10所示的核苷酸序列，其編碼RtFAS2亞基的第二ACP結構域；

(g)如SEQ?ID?NO：11所示的核苷酸序列，其編碼RtFAS2亞基的KR結構域；

(h)如SEQ?ID?NO：12所示的核苷酸序列，其編碼RtFAS2亞基的KS結構域；

(i)如SEQ?ID?NO：13所示的核苷酸序列，其編碼RtFAS2亞基的PPT結構域。

8.含有權利要求5-7中任何一項所述的核苷酸序列的表達盒或重組表達載體。

9.含有權利要求5-7中任何一項所述的核苷酸序列的細胞。

10.一種構建油脂生產重組細胞的方法，所述方法包括將權利要求3-7中任何一項所述的核苷酸序列或者權利要求8的表達盒或重組表達載體導入宿主細胞中，得到油脂生產重組細胞。