[發明專利]一種防治作物土傳病害生防菌劑的制備方法及其應用

無效

• 申請號: 201310066268.0
• 申請日: 2013-03-04
• 公開（公告）號: CN103141519A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 鄭雅楠;魏漢蓮;楊長成;高增貴;李可強;關昕;莊敬華
• 申請（專利權）人: 沈陽農業大學
• 主分類號: A01N63/04
• 分類號: A01N63/04;A01N43/80;A01P3/00;C12N3/00;C12R1/885
• 代理公司: 沈陽科威專利代理有限責任公司 21101
• 代理人: 張述學

1.一種防治作物土傳病害生防菌劑的制備方法，其特征在于包括如下具體步驟：

(1)斜面母菌種的制備：取作物根表土壤5-10克，加無菌水1000倍成稀釋液；

取馬鈴薯150-200克、葡萄糖15-20?克、孟加拉紅0.04-0.07克、硫酸鏈霉素0.03-0.04克、惡霉靈0.1-0.2克、瓊脂17-20克、水1000毫升制成菌種培養液；將稀釋液與菌種培養液按1∶9的重量比例一起倒入培養皿內制成平板，25-28℃下培養48小時，經分離獲得木霉菌菌株，經純化后轉移至試管斜面內作斜面母菌種；

(2)二級菌種的制備：取馬鈴薯150-200克、葡萄糖或蔗糖15-20克、水1000?毫升，配制成二級發酵培養液，調pH值為6-8，分裝在250-500毫升三角瓶中，裝液量為100-200毫升，在121℃下滅菌30-40分鐘，接入斜面母菌種，搖床轉速為150-200轉/分，發酵溫度26-30℃，發酵時間為2-4天，得到大量發散的絮狀菌絲及分散的分生孢子二級菌種；??????

(3)固體發酵：所采用的固體發酵培養基成分為：培養料草炭或秸稈粉或樹葉粉28-40克、稻殼10-12克、水50-60克、磷酸二氫鉀0.1-0.2克、硫酸鎂0.1-0.2克、硫酸鈣0.1-0.2克；先將無機鹽溶入水中，再將培養料與水充分混合后制成固體發酵培養基，固體發酵培養基裝入耐高溫塑料袋或發酵瓶中，在120℃下滅菌70-90分鐘，接入重量比例5-10％的二級菌種，控制發酵溫度為25-30℃，發酵時間4-6天，至培養料變成綠色即木霉菌分生孢子；

(4)?作物土傳病害生防菌劑的制備：將滿載木霉菌孢子的固體培養料經常溫干燥后，用萬能粉碎機粉碎成高濃度木霉菌孢子粉，取重量比例為30-49.99％孢子粉與重量比例為50-69.99％輕質碳酸鈣或硅藻土，再加入重量比例為0.01％的惡霉靈作為增效劑,?充分混合后制成木霉菌制劑。?

2.一種如權利要求1所述的防治作物土傳病害生防菌劑的應用，其特征在于將權利要求1制備的木霉菌生防菌劑200-400倍用于防治作物土傳病害，并可與殺菌劑惡霉靈4000-5000倍協同施用，其施用方法為床面拌土或浸蘸種苗或生長期灌根。