[發(fā)明專利]聚乙二醇修飾的重組人干擾素β-1b及制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310066150.8
• 申請日: 2013-03-01
• 公開（公告）號(hào): CN103113466A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張競;周展;蘇志國;馬光輝
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院過程工程研究所
• 主分類號(hào): C07K14/565
• 分類號(hào): C07K14/565;C07K1/113;A61K38/21;A61P31/12;A61P35/00;A61P35/02;A61P25/00;A61P29/00;A61P37/02
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種聚乙二醇（PEG）修飾的重組人干擾素β-1b，其特征在于，所述修飾產(chǎn)物結(jié)構(gòu)如式I所示：

PEG-IFN-β-1b????(I)

其中，所述重組人干擾素β-1b的N末端為絲氨酸，所述聚乙二醇與所述重組人干擾素β-1b的N末端共價(jià)偶聯(lián)；

優(yōu)選地所述聚乙二醇的端基結(jié)構(gòu)如式II所示：

PEG-A???????(II)

其中，A為氨基(-NH₂)、氧氨基(-O-NH₂)或酰肼基(-CO-NH-NH₂)；

優(yōu)選地所述聚乙二醇為單甲氧基聚乙二醇（mPEG）。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聚乙二醇修飾的重組人干擾素β-1b，其特征在于，所述聚乙二醇和所述重組人干擾素β-1b的連接鍵為亞胺肟

和酰腙中的一種，或者是胺氧胺

和酰胺中的一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的聚乙二醇修飾的重組人干擾素β-1b，其特征在于，所述聚乙二醇為直鏈、支鏈或者多臂聚乙二醇，優(yōu)選為直鏈聚乙二醇。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的聚乙二醇修飾的重組人干擾素β-1b，其特征在于，所述聚乙二醇的分子量范圍為2000Da-80000Da，優(yōu)選為5000Da-50000Da，更優(yōu)選為10000Da-30000Da。

5.如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的聚乙二醇修飾的重組人干擾素β-1b的制備方法，其特征在于，所述方法包括將重組人干擾素β-1b的N末端的絲氨酸氧化為醛基，之后與端基為氨、氧氨或酰肼的聚乙二醇共價(jià)偶聯(lián)。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(A)將重組人干擾素β-1b的N末端的絲氨酸氧化為醛基，如式（1）所示：

和

(B1)將端基為氨、氧氨或酰肼的聚乙二醇與步驟（A）獲得的產(chǎn)物反應(yīng)，進(jìn)行共價(jià)偶聯(lián)得到聚乙二醇定點(diǎn)單修飾N端的重組人干擾素β-1b，反應(yīng)如式（2）-（4）所示：

或者

(A)將重組人干擾素β-1b的N末端的絲氨酸氧化為醛基，如式（1）所示：

和

(B2)將端基為氨、氧氨或酰肼的活化聚乙二醇與步驟（A）獲得的產(chǎn)物反應(yīng)，反應(yīng)過程中加入還原劑，得到聚乙二醇定點(diǎn)單修飾N端的重組人干擾素β-1b還原產(chǎn)物，反應(yīng)式如（5）-（7）所示：

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟（A）中使用的氧化劑為氯化銨三氧化鉻、二氧化錳、高碘酸和高碘酸鹽，優(yōu)選為高碘酸鹽，更優(yōu)選為高碘酸鈉。

8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的制備方法，其特征在于，步驟（B）中使用的還原劑為硼氫化鈉、醋酸硼氫化鈉和氰基硼氫化鈉，優(yōu)選為氰基硼氫化鈉。

9.一種藥物組合物，其包含如權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的聚乙二醇修飾的重組人干擾素β-1b。

10.如權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的聚乙二醇修飾的重組人干擾素β-1b在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于預(yù)防和治療急性、慢性及復(fù)發(fā)性病毒感染疾病以及神經(jīng)系統(tǒng)炎性免疫性疾病，緩解并治療復(fù)發(fā)型多發(fā)性硬化疾病，以及治療惡性腫瘤如宮頸上皮內(nèi)腫瘤、腫瘤性胸腔積液、毛細(xì)胞性白血病、乳腺腫瘤或子宮內(nèi)膜腫瘤。